【摘 要】
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背景:D-limonene( D-L)是一种天然单萜烯类化合物,是桔皮精油中的主要成分,已被广泛用于香料工业中。在医药方面,具有抗氧化、抗炎、利胆溶石等作用。近年发现D-limonene 具
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背景:D-limonene( D-L)是一种天然单萜烯类化合物,是桔皮精油中的主要成分,已被广泛用于香料工业中。在医药方面,具有抗氧化、抗炎、利胆溶石等作用。近年发现D-limonene 具有抗癌活性, 对化学致癌物诱导的结肠癌、乳腺癌、胃癌、肺癌、皮肤癌、肝癌、胰腺癌等具有预防及治疗效果。目前对其抗癌作用的研究主要集中在对实体瘤的作用机制方面, 对非实体瘤包括白血病的研究报道尚少。目的:本实验通过不同浓度的D-L 作用于不同类型的人白血病细胞株,观察其对白血病细胞的生长抑制作用,流式细胞仪检测细胞的凋亡峰,以及对凋亡相关基因bax、bcl-2、突变型p53蛋白的表达情况的检测,探讨D-L 对人白血病细胞生长及凋亡的影响及其可能机制。方法:将购自于中国科学院上海细胞所的K562(人慢性粒细胞白血病细胞株)及HL-60(人早幼粒白血病细胞株)白血病细胞株分别常规培养于DMEM 培养液(含10%胎牛血清、100u/ml 青霉素和100ug/ml 链霉素,PH7.2)中, 置于37℃、5%CO2饱和湿度孵箱中培养。将对数生长期的白血病细胞以每孔1×105/L 的密度加入24 孔板中,每孔体积1ml,实验孔按1%DMSO 终浓度分别稀释加入0.5、0.6、0.7、0.8、0.9mmol/L 的D-L,每种浓度设3 孔重复,以1%DMSO 作为阴性对照组。培养目标24,48,72 小时后,分别加入浓度为1mg/ml 的PI,每孔20μl, 作用1 小时后,应用波长530nm 酶标仪检测细胞生长抑制率,流式细胞
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