MLST技术在婴幼儿配方奶粉中阪崎肠杆菌鉴定中的应用

来源 :福建农林大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:caiguoxi
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阪崎肠杆菌是肠杆菌的独立新属,即克罗诺杆菌属,其具有耐酸、耐干燥、抗渗透压的特性,因此,在食品、环境中易生存并广泛存在。若是感染此菌,容易得脑膜炎、小肠结肠炎和败血症等疾病,尤其在免疫力低的新生儿人群突显,死亡率高达50%以上,这可能与其具有一定的抗生素抗性以及耐药性,加大临床治疗的难度有关。目前,微生物学家对阪崎肠杆菌污染的最初来源仍不清楚。但从死亡病例报告表明感染阪崎肠杆菌的主要渠道跟婴儿配方奶粉息息相关。因此,对婴儿配方奶粉工厂的阪崎肠杆菌进行分子分型研究,并对阪崎肠杆菌的鉴定和溯源,在婴幼儿配方奶粉企业在阪崎肠杆菌在监控、预警、控制方面具有重要意义。传统的分子分型方法如随机扩增多态性DNA标记(RAPD)不能将克罗诺杆菌鉴定到种,且辨识度较低、重复性不高、容易混淆,而近几年发展较快且更高效快捷的分型方法多位点序列分型(MLST),能清晰的分辨出克罗诺杆菌每个基因的差别。本研究采用平板检测、分离合并采用API20E鉴定12000份婴儿配方奶粉样品,得以了解生产环境中的阪崎肠杆菌污染情况。结果在12000份样品中有61份样品均检出了阪崎肠杆菌,取具有代表性的婴儿配方奶粉中分离出24株菌株,经API20E试剂条鉴定为阪崎肠杆菌,再进经过MLST分型找出其中有22株有克罗诺杆菌ST分型。其中19株属于C.sakazakii,2株属于C.turicensis,1株属于C.dublinensis。通过构建进化树能清楚的识别进化关系和亲缘关系,能够很好的定种和追根溯源。
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