H9N2亚型禽流感病毒是目前危害山西省北部地区规模化蛋鸡养殖业最主要的病原体之一。为了调查本亚型禽流感在该地区的流行情况,本研究对2018～2019年该地区9个市（县）的众多规模化蛋鸡养殖场血清样本进行了抗体检测。对27例疑似病例进行了临床综合诊断、病毒分离培养、PCR检测、基因测序和遗传进化分析,进而揭示本病流行毒株在该地区的分子流行病学特点。本研究对来自该地区两年来不同日龄和不同季节的鸡群所采集的5122份血清样本进行了HI抗体水平的检测。检测结果显示:该地区H9N2亚型禽流感整体免疫情况普遍较好,抗体平均值处于8.48 Log 2～10.98 Log 2之间,表明鸡群抗感染能力相对较高。2019年抗体各项指标较2018年均有所提升。每年春冬两季抗体水平高于夏秋两季,其抗体均值差异至少可达到1 Log 2以上,优秀率也存在10%以上的差异。不同日龄段的鸡群抗体滴度均较为理想,并且随着日龄逐渐增加鸡群抗体指标和免疫水平呈现稳步上升的趋势。值得关注的是个别鸡群（60≤日龄≤120）抗体均值和优秀率偏低,可能存在一定程度的感染风险。同时,对27例疑似病例进行实验室检测后,检测出H9N2亚型禽流感阳性病料11份,检出率占所有被检疑似病例总数的40.74%;通过临床诊断与实验室诊断相结合的方法,充分证实了H9N2亚型禽流感病毒是引起雏鸡早期呼吸道疾病以及各日龄段鸡群出现“支气管栓塞”症状的主要病原体之一。本研究最终从11份阳性病料中成功分离出三株当地流行株,并将其分别命名为SXJB1、SXJB2、SXJB3。基因测序结果显示:分离株彼此间HA基因核苷酸序列同源性为96.4%～97.3%,氨基酸同源性为97.2%～97.7%,亲缘关系密切;分离株与12株参考株相比,其核苷酸同源性介于88.4%～98.0%之间;分离株与疫苗株F株和SS株核苷酸的同源性均低于90%,但与疫苗株WJ57株同源性却达到95.5%～96.2%,可见WJ57株是一株针对当前本地区H9N2亚型禽流感流行株较为理想的疫苗候选株。系统进化树分析结果显示:分离株均属于BJ/94-like欧亚大分支,与福建、江西、安徽、河北等地分离株亲缘关系较近。本研究为H9N2亚型禽流感今后的临床诊断和综合防控提供了可靠的参考依据。