血管内皮生长因子(VEGF183)转基因小鼠的研究

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一.VEGF183基因的克隆;该研究以RT-PCR方法从人肝组织中克隆得到VEGF183 Cdna.并将其克隆进真核表达载体Pcr3.1,构建成重组载体pCR3.1-VEGF183.二.VEGF183表达细胞的建立;pCR3.1-VEGF183通过脂质体转染293细胞,并建立了VEGF183稳定表达细胞株,这证明VEGF183 cDNA基因的正确.同时我们还研究了肝素对VEGF183细胞膜结合活性的影响.三.VEGF转基因动作的制作:利用PCR方法,从人肝组织基因组中扩增出一段1.3kb大小感光细胞间维生素A类结合蛋白(IRBP)的启动子区,将其克隆到pMD18-T载体,构建成载体pVTI.然后从pQBI-VEGF183中扩增出VEGF cDNA及其polyA序列,并将其插入pVTI载体构建成重组载体Pvtiv183.
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