葡萄酒中白藜芦醇及其糖苷异构体的检测方法研究

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白藜芦醇及其糖苷异构体对葡萄酒的品质评定有着极其重要的影响,所以探索一种操作简单,结果准确的检测方法一直是葡萄酒分析中比较热门的研究。本研究建立HPLC法检测葡萄酒中白藜芦醇及其糖苷异构体的方法;比较了不同有机溶剂和双水相体系对葡萄酒中白藜芦醇及其糖苷异构体的提取效果;对不同固相柱萃取葡萄酒中白藜芦醇及其糖苷异构体的条件进行优化,建立了葡萄酒中白藜芦醇及其糖苷异构体的固相萃取方法。具体内容如下:1.建立了高效液相色谱法同时测定葡萄酒中白藜芦醇及其糖苷异构体的方法。分别考察了流动相比例,体系pH,检测波长,柱温等因素对四种多酚类物质的标准品和葡萄酒样品分离效果的影响。此方法中测得白藜芦醇及其糖苷异构体的加标回收率为93.69%-103.24%,相对标准偏差为0.64%-3.24%(n=6),反式-白藜芦醇和反式-白藜芦醇苷的检出限为0.3μg/L,顺式-白藜芦醇和顺式-白藜芦醇苷的检出限为0.7μg/L。该方法简便、快速,适用于葡萄酒中白藜芦醇及其糖苷异构体的检测。2.本实验选用有机溶剂乙酸乙酯,乙酸乙酯:正己烷(50:50/10:90/90:10),氯仿,乙醚,乙酸乙酯:二氯甲烷(50:50/10:90/90:10)对葡萄酒中白藜芦醇及其糖苷异构体进行提取效果比较;比较乙酸乙酯和硫酸铵乙醇水溶液的双水相体系对葡萄酒中白藜芦醇及其糖苷异构体的提取效果,乙酸乙酯提取葡萄酒样品中白藜芦醇及其糖苷异构体的效果比较好。乙酸乙酯对反式-白藜芦醇苷和反式-白藜芦醇的萃取回收率可以达到90%以上,对顺式-白藜芦醇及其苷的萃取率小于80%。3.建立了葡萄酒中白藜芦醇及其糖苷异构体四种茋类化合物的固相萃取方法。使用C18,PLS,PXA三种固相柱探讨样品的固相萃取前处理条件。其中使用C18固相萃取柱白藜芦醇及其糖苷异构体的加标回收率为78.54%~84.32%,相对标准偏差为0.34%~2.32%(n=6);使用PLS固相萃取柱白藜芦醇及其糖苷异构体的加标回收率为82.98%~90.06%,相对标准偏差为2.87%~4.69%(n=6);运用PXA固相萃取柱白藜芦醇及其糖苷异构体的加标回收率为84.6%~108%,相对标准偏差为2.4%~3.0%(n=6)。三种柱子均可用于葡萄酒中白藜芦醇及其糖苷异构体的检测。不同品质的葡萄酒中白藜芦醇及其糖苷异构体的含量不同。品质比较好的葡萄酒中白藜芦醇及其糖苷异构体的含量比较高。低品质的和人工勾兑的葡萄酒中白藜芦醇及其糖苷异构体的含量很低或者根本没有。本研究工作的意义就是通过对葡萄酒中白藜芦醇及其糖苷异构体的测定,以实现对葡萄酒的品质评价。
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