KLK10在胃癌中的表达及其临床意义

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目的:检测KLK10在胃癌组织及细胞株中的表达,分析KLK10表达与临床病理因素的关系,及判断KLK10是否可以作为胃癌患者术后独立的预后因素,并检测其准确性。方法:1、应用免疫组织化学SP法检测80例胃癌组织及癌旁组织中hK10表达。2、体外传代培养MKN28(高分化)、BGC823(低分化)胃癌细胞和正常胃粘膜细胞,取对数生长期的细胞,提取各组细胞总RNA,采用反转录聚合酶链反应检测KLK10基因的表达水平;分别以MTT法和细胞划痕法检测KLK10对胃癌细胞增殖、迁移能力的影响。3、对80例胃癌患者进行随访,以无病生存期(DFS)和总生存期(OS)为评价指标,Kaplan-Meier生存曲线分析KLK10表达与胃癌患者术后DFS和OS的关系,Log-rank test检测其生存率,COX多因素回归分析法评价KLK10是否可以作为胃癌患者术后独立的预后因素,ROC曲线检测其准确性。结果:1、免疫组化实验发现,胃癌组织中hK10的表达较癌旁组织明显增高,其表达与浸润深度、淋巴结转移和组织分化程度相关(P值分别为0.034、0.048、0.015),与胃癌患者的性别、年龄无关。2、RT-PCR结果显示:KLK10mRNA在人MKN28和BGC823胃癌细胞株中都有较高程度的表达,其表达因细胞株不同而异。MTT测定,发现Leupeptin(KLK10抑制剂)能抑制胃癌细胞体外增殖(P<0.01),;划痕试验证实,Leupeptin对胃癌细胞的迁移有抑制作用。3、KLK10阴性表达者DFS及OS优于阳性表达者,差异具有统计学意义(P值分别为0.003、0.002)。胃癌患者的DFS.OS与肿瘤的浸润深度、淋巴结转移及组织分化程度相关,差异具有统计学意义(P分别为<0.001、0.009、<0.001;<0.001、0.007、<0.001)。COX多因素回归分析结果显示:KLK10的表达与DFS无关(HR=0.58,95%CI:0.33~1.02,P=0.06),不能作为无病生存的独立预后因素。但与OS相关(HR=0.55,95%CI:0.31~0.96,P=0.03),可以作为总生存的独立预后因素。同时发现:浸润深度可以作为胃癌术后患者无病生存的独立预后因素(HR=1.42,95%CI:1.02~1.98,P=0.03);组织分化程度是胃癌患者术后无病生存和总生存的独立预后因素(HR=11.11,95%CI:5.87~21.02,P<0.001;HR=12.90,95%CI:6.55~25.41,P=0.03)。ROC曲线显示:KLK10可以作为判断胃癌术后DFS的预后指标,价值较低。但在判断胃癌术后OS的预后中,具有中等价值。结论:胃癌组织中hK10的表达明显高于癌旁组织,hK10的表达水平与性别、年龄无关,与肿瘤的浸润深度、淋巴结转移和组织分化程度相关。KLK10基因在不同胃癌细胞株中表达不同,并参与了胃癌细胞的增殖和迁移。KLK10的表达及组织分化程度是胃癌患者术后的独立预后因素。其对判断预后有一定价值。
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