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目的:检测六种牙科铸造合金全冠戴用后实验动物狗颊黏膜上皮细胞、
牙龈组织、外周静脉血以及肝、肺、肾组织中金属离子的种类和浓度,同时研
究颊黏膜上皮细胞DNA损伤情况、外周静脉血淋巴细胞凋亡情况以及PCNA、
Bcl-2蛋白在牙龈组织和肝、肺、肾组织中的表达。探讨与研究六种牙科铸造
合金腐蚀后析出金属离子对机体组织的影响以及合金全冠修复的生物学效应,
为合金材料的改性研究、新合金材料的开发研究和临床上合理地选用合金材料
提供一些依据。
方法:对实验动物狗分别行金合金(58%)、纯钛、钴铬钼合金、不含Be
的镍铬合金、含Be的镍铬合金、铜合金铸造全冠修复,建立实验动物模型。在
戴冠前、戴冠2周、1月、2月及3月时采用先进的VG-X7型电感耦合等离子体质
谱仪、IRIS Intrepid型电感耦合等离子体原子发射光谱仪检测颊黏膜上皮细胞、
牙龈组织、外周静脉血中金属离子的种类和浓度,同时应用了彗星电泳方法检
测颊黏膜上皮细胞DNA损伤情况、使用FACScan型流式细胞仪检测外周静脉血
中淋巴细胞凋亡情况、采用免疫组化(EnVision二步法)检测PCNA、Bcl-2蛋白
在牙龈组织中表达的情况。在戴冠3月时处死动物并检测肝、肺、肾组织中金
属离子的种类和浓度,同时应用免疫组化(EnVision二步法)检测PCNA、Bcl-2
蛋白在肝、肺、肾组织中表达的情况。
结果:
1.58%金合金、纯钛全冠戴用后,在颊黏膜上皮细胞、外周静脉血、牙龈
组织以及肝、肺、肾组织中均没有检测到金属离子浓度显著的升高。钴铬钼合
金、不含Be的镍铬合金、含Be的镍铬合金和铜合金全冠戴用后,颊黏膜上皮
细胞、外周静脉血及牙龈组织中均检测到一些金属离子浓度显著的升高,而在
肺、肾组织中没有检测金属离子浓度显著的升高;镍铬合金和铜合金全冠戴用
后,在肝组织中检测到一些金属离子浓度显著的升高。
2.钴铬钼合金、不含Be的镍铬合金、含Be的镍铬合金和铜合金全冠戴用
后,一些金属离子析出明显,浓度随时间延长而逐渐升高,戴冠3月与2月间金
属离子浓度差异不明显。
3.58%金合金、纯钛和钴铬钼合金全冠戴用后,未导致颊黏膜上皮细胞
DNA明显的损伤(58%金合金全冠仅在戴冠2周时DNA发生了损伤,到戴冠1
月时DNA损伤得以恢复)。而不含Be的镍铬合金、含Be的镍铬合金和铜合金全
冠戴用后,均导致颊黏膜上皮细胞DNA明显损伤(其中后二者更明显),颊黏
膜上皮细胞DNA损伤与颊黏膜上皮细胞中Ni、Cr、Be、Cu、Zn离子浓度的升
高正相关。
4.58%金合金、纯钛全冠戴用后,没有导致外周静脉血中淋巴细胞凋亡的
增加。而钴铬钼合金、不含Be的镍铬合金、含Be的镍铬合金和铜合金全冠戴
用后,均导致外周静脉血中淋巴细胞凋亡的明显增加(其中后二者更严重),
外周静脉血中淋巴细胞凋亡与外周静脉血中Ni、Cr、Co、Cu、Zn离子浓度升
高正相关。
5.组织切片观察(HE染色)显示,58%金合金、纯钛全冠戴用后,牙龈
组织未见明显异常;而钴铬钼合金、不含Be的镍铬合金、含Be的镍铬合金与
铜合金全冠戴用2周、1月时牙龈组织的炎症反应趋于活跃,基底细胞水肿,有
大量中性白细胞浸润;戴冠2月、3月时炎症反应逐渐稳定,转入慢性炎症期,
皮下有散在淋巴细胞、浆细胞浸润。六种牙科铸造合金全冠戴用3月时,肝、
肺、肾组织切片未见明显异常
6.58%金合金、纯钛全冠戴用后,PCNA、Bcl-2蛋白在牙龈组织中的表达
率均无显著变化。而钴铬钼合金、不含Be的镍铬合金、含Be的镍铬合金和铜
合金全冠戴用后,PCNA、Bcl-2蛋白在牙龈组织的表达均显著升高,PCNA蛋
白表达率与牙龈组织中Ni、Cr、Be、Si、Co、Cu、Zn浓度呈正相关,Bcl-2蛋
白阳性表达率与牙龈组织中Cu离子浓度呈正相关。六种牙科铸造合金全冠戴
用3月时,PCNA、Bcl-2蛋白在肝、肺、肾组织中均没有表达。
结论:
1.58%金合金、纯钛全冠戴用后,颊黏膜上皮细胞、外周静脉血、牙龈组
织以及肝、肺、肾组织中均没有检测到金属离子浓度的升高;戴用后没有导致
颊黏膜上皮细胞DNA明显的损伤,没有导致外周静脉血中淋巴细胞凋亡的增
加,牙龈组织以及肝、肺、肾组织细胞的代谢与凋亡没有受到影响。所以58%
金合金、纯钛的耐腐蚀性能良好,生物相容性良好。
2.钴铬钼合金全冠戴用后,颊黏膜上皮细胞、外周静脉血以及牙龈组织
中均检测到一些金属离子浓度的明显升高;虽然没有引起颊黏膜上皮细胞
DNA明显损伤以及肝、肺、肾组织细胞的代谢与凋亡也未受到影响,但戴用
后引起外周静脉血中淋巴细胞凋亡明显增加,引起牙龈组织炎症并明显影响细
胞的代谢与凋亡。所以钴铬钼合金耐腐蚀性能比金合金、纯钛差,生物相容性
也较差。
3.镍铬合金、铜合金全冠戴用后,颊黏膜上皮细胞、外周静脉血、牙龈
组织以及肝组织中均检测到一些金属离子浓度的明显升高;戴用后导致颊黏膜
上皮细胞DNA严重损伤,导致外周静脉血中淋巴细胞凋亡明显增加,导致牙
龈组织炎症并明显影响细胞的代谢与凋亡(铜合金更严重),而肝、肺、肾组
织细胞的代谢与凋亡没有受到影响。所以镍铬合金、铜合金耐腐蚀性能较差(其
中以铜合金耐腐蚀性能比镍铬合金差),生物相容性较差,金属离子析出是导
致牙龈组织色素斑及牙龈灰线的主要原因。
4.与不含Be的镍铬合金相比,含Be的镍铬合金全冠戴用后,不仅金属离
子析出明显,而且导致机体组织细胞的损伤更严重。所以含Be的镍铬合金耐腐
蚀性能比不含Be的镍铬合金更差。
5.六种牙科铸造合金全冠戴用后,金属离子的析出对机体影响的程度为
铜合金最严重,镍铬合金其次,钴铬钼合金再次,而58%金合金、纯钛几乎没
有引起机体的明显变化。
6.口腔修复临床上要慎用含Be的镍铬合金和铜合金。
关键词:牙科铸造合金;金属离子;耐腐蚀性;DNA损伤;凋亡;PCNA;Bcl-2