铁皮石斛质量评价及干燥工艺研究

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铁皮石斛Dendrobium officinale Kimura et Migo,兰科,多年生附生性草本植物,其茎干燥后入药,又被叫做铁皮兰、黑节草,具有益胃生津、滋阴清热、润肺止咳、延年益寿等功效。现代药理研究表明,铁皮石斛具有抗衰老、抗肿瘤、降低血糖和提高免疫力等作用。目前铁皮石斛质量控制方面存在很多不足的地方,如现有的质量标准欠完善,不能准确的评价铁皮石斛的质量优劣;铁皮石斛的原产地遍布十多个省份,这些原产地不同的铁皮石斛品种之间化学成分的差异造成了铁皮石斛质量的不均一性;现有的铁皮石斛的干燥方法对于干燥的温度、时间都没有一个量化的指标,从而也在一定程度造成了铁皮石斛的质量良莠不齐,等等。本课题针对这些问题展开了研究。目的:补充铁皮石斛质量评价的指标,对原产地不同的铁皮石斛比较其部分化学成分的差异,进而比较其质量的差异,采用主成分成分分析方法,尝试一定程度的评价不同产地的铁皮石斛的质量优劣;并且结合产地的地理气候信息进行相关性分析,考察铁皮石斛最佳的生长环境条件,为铁皮石斛选育和种植提供依据。此外,本研究还对铁皮石斛的干燥工艺在现有的基础上进行了初步的论证研究,为铁皮石斛的后续加工处理提供依据,以保证铁皮石斛成品的质量。方法:1.建立3,5-二硝基水杨酸法(DNS法)测定铁皮石斛多糖的分析方法,同时采用苯酚硫酸法和DNS法测定铁皮石斛多糖的含量,建立紫外分光光度法和柱前衍生-HPLC法,测定总氨基酸和游离氨基酸的含量以及必需氨基酸所占的比例,从而完善铁皮石斛的质量标准。2.对石斛多糖的柱前衍生过程中的三氟乙酸(TFA)的水解条件进行考察优化,建立柱前衍生HPLC检测多糖中的单糖组分的方法。测定并比较不同产地铁皮石斛样品的多糖单糖组分。3.按照补充完善的新的质量标准,结合主成分分析方法和加权评分法,对9个铁皮石斛主要产地的样品的质量优劣进行评价。4.根据铁皮石斛的质量优劣评价结果,结合产地的地理气候信息进行相关性分析,考察铁皮石斛最佳的生长环境条件,为铁皮石斛种植的生长环境条件的控制提供依据。5.对鲜品的干燥方式、干燥温度、干燥时间进行考察,对整个干燥过程进行优化论证。结果:1.建立的DNS法、紫外分光光度法测定总的氨基酸和总的游离氨基酸的方法以及柱前衍生-HPLC法测定17种氨基酸含量的方法其精密度及重复性均较好,较为稳定、准确度较好。2.多糖的单糖组成分析过程中多糖的最佳TFA水解条件是:1.0m1供试品溶液(含多糖约1.5mg)加2.0mol· L-1的TFA2.0mL,100℃条件下水解2h。不同产地的样品的多糖的单糖组成不同,其中甘露糖和葡萄糖的峰面积最高可以分别相差2.08倍和1.68倍;即使同一产地的样品,其多糖的单糖组成也存在差异,各产地的样品各个单糖的绝对峰面积的比值的RSD(%)均大于5.0%。3.不同产地的样品质量优劣分析结果:T13(广西西林)和T29(福建冠豸山)的样品排名靠前,说明这两个产地的铁皮石斛的质量可能较其他的样品优良,T16(广昌)和T18(广东河源)的样品排名靠后,一定程度地表明这两个产地的样品的品质可能略差一些。4.铁皮石斛的质量优劣和地理气候等因素有一定的相关性,质量的排名和平均气温、气温差、平均降雨量、相对湿度、日照时间呈负相关;质量的排名和海拔高度呈正相关。5.从氨基酸和多糖保留率和能量消耗及效率的角度,干燥温度采用90℃,干燥时间控制在24h-36h内的方式较佳。梯度升温干燥的样品的多糖和氨基酸的保留率都比恒温干燥的样品好,但是所耗费的时间稍长。结论:对不同产地的铁皮石斛的部分化学成分含量差异进行了分析比较,一定程度地评价了不同产地的铁皮石斛的质量优劣;分析了铁皮石斛的部分生长环境条件与其质量优劣的相关性;并对铁皮石斛鲜品的干燥过程进行了研究论证和优选。本实验研究为铁皮石斛的人工种植从最初的品种选育至种植过程中环境条件的控制到最后的干燥加工过程提供了一个参考。
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