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绞股蓝(Gyntstemma pentaphyllum(Thunb.)Makino)又名七叶胆、五叶参、小苦药、遍地生根、公罗锅底,是葫芦科(Cucurbitaceae)绞股蓝属(Gynostemma)的多年生草质藤本植物。绞股蓝含有多种药用成分,如皂苷、黄酮、多糖等,可全株入药,具有降血脂、降血压、抗氧化、免疫调节、延长细胞寿命等作用,被誉为“人间仙草”。绞股蓝属于雌雄异株,自然条件下结种子量较小,在农业生产中,绞股蓝主要依靠根状茎来繁殖。而对于绞股蓝种子,一方面尚未引起人们的充分重视,研究甚少;另一方面通常只用于有性繁殖或废弃,没有得到充分利用。因此,本实验以绞股蓝种子为研究对象,对其主要成分油脂进行生物学研究,旨在为绞股蓝的全面开发与利用提供理论基础和技术支持。本实验分别采用正交法和响应面法优化绞股蓝种子油超声和微波提取工艺,以期最大限度提取绞股蓝种子油,并利用电子扫描显微镜观察超声和微波提取后的残渣粉与未经提取的原种子粉的表面微观结构;采用GC-MS法分析比较了不同溶剂提取绞股蓝种子油脂肪酸成分;通过颈背部皮下注射D-半乳糖建立小鼠衰老模型,检测血清和组织中的生理生化指标,观察小鼠肝组织切片,研究绞股蓝种子油抗衰老作用。实验研究结果如下:(1)采用正交法优化超声提取绞股蓝种子油工艺,得到最优提取条件:料液比1:20 g/mL,超声功率300 W,超声时间40 min。在此条件下测得绞股蓝种子油得率为40.94%,RSD为0.11%,表明该提取方法合理可靠,达到了优化的目的,具有一定的参考价值。(2)运用响应面法优化绞股蓝种子油的微波辅助提取工艺,建立数学模型。利用模型方程得到最佳工艺参数为料液比1:15 g/mL,微波温度59 ℃,微波时间14 min,微波功率600 W。经此条件下提取绞股蓝种子油得率为42.01%,与理论值41.25%相比,相对误差为1.85%。说明通过该数学回归模型,预测值和实际值拟合度较好,表明此方法合理可靠,可为绞股蓝种子后续合理开发利用提供理论依据。同时分别对超声和微波提取后的种子残渣粉和原种子粉进行电子扫描显微镜观察,发现残渣粉表面均破坏严重,说明超声和微波提取绞股蓝种子油较充分。(3)采用GC-MS法分析比较不同溶剂提取绞股蓝种子油脂肪酸成分,结果表明,不同提取溶剂所提取的绞股蓝种子油脂肪酸成分相差较大,但均含有大量的不饱和脂肪酸,尤其是十八碳三烯酸。(4)绞股蓝种子油抗衰老实验结果表明,各给药组可缓解小鼠饮食量下降,皮毛光泽度变差,行动缓慢,体重增加缓慢甚至下降的症状;小鼠血清生化指标总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)说明绞股蓝种子油可保护血管进而起到抗衰老作用;小鼠组织生化指标结果说明绞股蓝种子油在一定程度上能显著辅助和增强超氧化物歧化酶(SOD)活性,降低丙二醛(MDA)活性,提高总抗氧化(T-AOC)能力。表明绞股蓝种子油抗衰老机理之一可能与其具抗氧化能力有关,通过增强机体的总抗氧化能力从而有效清除多余的自由基,降低机体细胞损伤程度,间接保护正常细胞,从而起到抗衰老的作用。