葡萄霜霉病生防菌株的筛选及应用

来源 :河北农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wangnayangyang
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为探索葡萄霜霉病的生物防治方法,降低葡萄产量和品质的损失及使用化学药剂造成的污染,本文以河北农业大学标本园中的葡萄和土壤为试材,研究了葡萄霜霉病菌拮抗细菌对该病害的防治作用。本研究采用平板稀释法分离生防细菌,利用室内离体叶片混合点样法和田间喷施法筛选对葡萄霜霉病菌具有抑制作用的拮抗细菌;采用摇瓶发酵法对生防菌株CN181的发酵条件进行了优化;通过田间区组试验测定了微生物菌肥对葡萄霜霉病的防治效果,并检测了3种微生物菌肥对葡萄叶片的光合作用及葡萄叶片中叶绿素含量、可溶性蛋白含量和过氧化物酶(POD)活性的影响。主要研究结果如下:  分离试验共获得了31株芽孢杆菌和38株内生细菌,其中芽孢杆菌T1-2和T3及内生菌G1、G5和G9发酵液对葡萄霜霉病菌的室内抑制率达到100%,与对照生防菌株CN181一致。两次田间试验结果表明,在7d时,清水对照的病情指数增加值平均为44.3,经过菌株T3发酵液处理后,葡萄霜霉病病情指数的增加值平均为21.0,对葡萄霜霉病的相对防治效果为52.4%,与生防菌株CN181发酵液无显著差异;而经内生菌G1发酵液处理后,葡萄霜霉病病情指数增加值平均为24.8,显著低于清水对照;对葡萄霜霉病的相对防治效果为43.8%。菌株T3和G1对葡萄霜霉病具有较好的拮抗作用,对葡萄霜霉病的防治效果较好。经16S rDNA分子鉴定,菌株T3和G1分别为甲基营养型芽孢杆菌(Bacillus methylotrophicus)和解淀粉芽孢杆菌(B.amyloliquefaciens)。这两株菌在代谢过程中均可产生蛋白酶、纤维素酶和嗜铁素。研究结果表明,菌株T3和G1对葡萄霜霉病菌具有较好的抑制作用,并对葡萄霜霉病具有较好的防治效果。  单因子试验结果表明,玉米粉为最适碳源,豆粕为最适氮源,K+和Na+为最适金属离子。正交试验结果表明,发酵液中各组分的最佳含量分别是:玉米粉15.0 g/L、豆粕10.0 g/L、K2HPO42.0 g/L和NaCl 2.0 g/L。菌株CN181发酵的最适优化条件为:发酵培养基的初始pH值8.0、250 mL摇瓶装液量30mL、接种量2%(体积分数)、培养温度30℃、转速180 r/min、培养时间24h。  微生物菌肥对葡萄霜霉病生理活性研究的结果表明,3种微生物菌肥对葡萄霜霉病菌的发生均有一定抑制作用,且三者之间无显著差异;对葡萄叶片的光合作用及叶片中可溶性蛋白含量和POD活性均表现出不一致的影响;对葡萄叶片中叶绿素含量无显著影响。
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