【摘 要】
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林下经济作物大花蕙兰(Cymbidium hybridum)为兰科(Orchidaceae)兰属(Cymbidium)的多年生草本植物。作为全世界最重要的商品盆花和鲜切花之一,在国内外市场上广受欢迎。前期研究发现大花蕙兰与某些真菌形成共生关系,真菌可促进宿主幼苗鲜重增加和干物质积累。大量研究表明,真菌的挥发性成分可以影响植物的生长发育,那么大花蕙兰有益菌株的挥发性物质是否也可以影响植物生长发育,并
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(31170654)---伴生真菌协同兰科丝核菌促进兰花生长的细胞与分子机制
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林下经济作物大花蕙兰(Cymbidium hybridum)为兰科(Orchidaceae)兰属(Cymbidium)的多年生草本植物。作为全世界最重要的商品盆花和鲜切花之一,在国内外市场上广受欢迎。前期研究发现大花蕙兰与某些真菌形成共生关系,真菌可促进宿主幼苗鲜重增加和干物质积累。大量研究表明,真菌的挥发性成分可以影响植物的生长发育,那么大花蕙兰有益菌株的挥发性物质是否也可以影响植物生长发育,并通过这种方式对植物生态群落起到调节作用呢?本研究比较分析了大花蕙兰菌根真菌瘤菌根菌(Epulorhiza repens)ML01和其它有益菌株的挥发性有机化合物(Volatile organic compounds,VOCs)成分;探究培养基质、检测方法及培养时间对ML01的VOCs成分和相对含量产生的影响;阐释真菌VOCs(m VOCs)对拟南芥生长产生的影响以及可能的作用机制,并探讨ML01特征性香气物质丙位癸内酯在该调控过程中的可能作用。本研究将为进一步阐释m VOCs影响植物的机制打下基础。本论文主要研究结果如下:(1)建立真菌与拟南芥的共培养体系以试验m VOCs对拟南芥生长的影响。该体系的关键要点:选择生长一致的拟南芥起始材料(竖直板萌发5 d);13x13 cm方形培养皿中实现拟南芥与真菌的共培养,真菌培养采用自制的约30 cm~2铝箔纸容器以确保真菌有足够的生长空间但始终与拟南芥物理隔离;每皿9株拟南芥植株以保证其侧根正常生长;密封材料采用保鲜膜;共培养期间平板垂直放置;共培养温度25℃-26℃。在该共培养体系中,可以清晰地观察到大花蕙兰有益菌株ML01、M1和C2Y1的挥发性成分可以促进野生型拟南芥主根伸长、侧根数量增加和植株生物量累积。(2)ML01的VOCs处理4 d后,拟南芥生长素受体基因缺失突变体tir1-1侧根数量不变,但三个乙烯信号路径突变体对ML01的VOCs的响应与野生型类似,因而推测ML01的VOCs对拟南芥侧根生长的促进作用不依赖于乙烯信号路径,而与生长素信号路径相关。(3)确定了大花蕙兰有益菌株VOCs适用的检测方法,并利用气相色谱-质谱联用技术分析其在不同培养基、不同生长时期挥发性物质种类及相对含量。经过一系列对比,总结出ML01、M1、印度梨形孢(Piriformospora indica)DSM11827、C2Y1的挥发性成分。ML01的重要挥发性组分有丙位癸内酯、十六酸、2,6,10,14-四甲基十五烷、癸醛、植烷、十四酸甲酯和邻苯二甲酸异丁基辛酯等化合物。M1相对含量较多的挥发性组分是苯甲酸乙酯、2,6-二叔丁基苯醌、Decane,3,6-dimethyl-、苯乙酮和Oxalic acid,decyl propyl ester。印度梨形孢相对含量较高的挥发性组分有苯甲酸乙酯、苯甲酸甲酯、辛酮和正十三烷。C2Y1的最主要的挥发性成分是丙位癸内酯。(4)ML01特征性香气成分丙位癸内酯处理对拟南芥生长的效应与作用浓度相关。29.4μM丙位癸内酯处理可以显著促进拟南芥的侧根发生,但高于58.8μM的浓度则对拟南芥的根系生长起抑制作用。
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