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目的：
近视在近些年发病率日益增高，是临床常见的屈光不正，其发病机制复杂，但目前尚未明确。多巴胺（Dopamine，DA）是视网膜上重要的神经递质，与近视密切相关。多巴胺D2受体部分激动剂阿立哌唑(Aripiprazole，APZ)对多巴胺D2受体亲和力较强，完全激动剂缺乏时，表现出功能性激动作用，完全激动剂充足时，表现出功能性拮抗作用。本课题组前期研究发现阿立哌唑能够抑制小鼠形觉剥夺性近视（Form deprivation myopia，FDM）而不影响正常屈光发育。本实验通过比较APZ与多巴胺D2受体激动剂喹吡罗、拮抗剂舒必利对多巴胺D2受体下游信号通路的作用，模拟出APZ对近视的作用机制，从而反映多巴胺D2受体在近视发生发展中的作用机制。
方法：
本实验选取4周龄的野生型C57BL/6小鼠，将满足屈光条件的小鼠随机分成阿立哌唑药物组和多巴胺D2受体药物组。
1.免疫蛋白印迹（Western-blot，WB）实验。将阿立哌唑药物组随机分成三组：溶剂组（10％二甲基甲酰胺；n=5），低剂量阿立哌唑药物组（1mg/kg；n=5），高剂量阿立哌唑药物组（10mg/kg；n=5），每组进行持续4周的单眼形觉剥夺，并且每日腹腔注射溶剂或药物。将多巴胺D2受体药物组随机分成三组：溶剂组（抗坏血酸；n=6），多巴胺D2受体激动剂喹吡罗（Quinpirole）组（n=6），多巴胺D2受体拮抗剂舒必利（Sulpiride）组（n=6），腹腔注射药物一天。前者三个小组在实验4周结束时分别于注射药物0.5h、1h、1.5h后取材，后者三个小组在实验当天分别于注射药物0.5h、1h、1.5h后取材。所有小鼠的视网膜利用WB技术检测多巴胺D2受体下游信号分子pERK的变化情况。
2.环磷酸腺苷（cyclic adenosine monophosphate，cAMP）的提取与检测实验。将阿立哌唑药物组随机分成三组：溶剂组（10％二甲基甲酰胺；n=10），低剂量阿立哌唑药物组（1mg/kg；n=12），高剂量阿立哌唑药物组（10mg/kg；n=14），每组进行持续4周的单眼形觉剥夺，并且每日腹腔注射溶剂或药物。将多巴胺D2受体药物组随机分成三组：溶剂组（抗坏血酸；n=11），多巴胺D2受体激动剂喹吡罗（Quinpirole）组（n=14），多巴胺D2受体拮抗剂舒必利（Sulpiride）组（n=14），同样地，每组进行持续4周的单眼形觉剥夺，并且每日腹腔注射溶剂或药物。各小组在实验4周结束时分别于注射药物0.5h、1h、1.5h后取材，提取所有小鼠视网膜cAMP，利用试剂盒检测其多巴胺D2受体下游信号cAMP的变化情况。
3.电生理实验。将多巴胺D2受体药物组随机分成三组：溶剂组（抗坏血酸；n=15），多巴胺D2受体激动剂喹吡罗（Quinpirole）组（n=15），多巴胺D2受体拮抗剂舒必利（Sulpiride）组（n=12），每组进行持续2周的单眼形觉剥夺，并且每日腹腔注射溶剂或药物。实验结束时利用电生理系统生成相应的视网膜电图（Retinal Current Diagram，ERG），进而检测视网膜功能。
结果：
1.注射药物0.5h后，多巴胺D2受体激动剂喹吡罗组与溶剂组相比，pERK1明显上升（p=0.019），多巴胺D2受体拮抗剂舒必利组与溶剂组相比pERK变化不明显，但与多巴胺D2受体激动剂喹吡罗组相比，pERK1明显下降（p=0.010）。注射0.5h后溶剂组剥夺眼较对侧眼pERK2明显下降（p=0.016），高剂量阿立哌唑组剥夺眼与溶剂组剥夺眼相比pERK1明显上升（p=0.017），低剂量阿立哌唑组剥夺眼与溶剂组剥夺眼相比pERK变化不明显，各组对侧眼之间pERK变化也不明显。
2.注射药物0.5h后，多巴胺D2受体激动剂喹吡罗组与溶剂组相比，cAMP明显下降（p=0.034），多巴胺D2受体拮抗剂舒必利组与溶剂组相比cAMP变化不明显；注射0.5h后低剂量阿立哌唑组剥夺眼与溶剂组剥夺眼相比cAMP水平下降（p=0.029），各组对侧眼之间cAMP变化也不明显。
3.舒必利可以明显降低视网膜最大混合反应的a波振幅（p=0.043）和b波振幅（p=0.039），喹吡罗存在降低视网膜最大混合反应的a、b波振幅趋势。
结论：
对形觉剥夺小鼠腹腔注射阿立哌唑0.5h以及对小鼠腹腔注射喹吡罗0.5h，均可使其视网膜pERK水平升高，cAMP水平降低，多巴胺D2受体拮抗剂舒必利与激动剂喹吡罗相比，可以使视网膜pERK水平降低，这提示多巴胺D2受体部分激动剂阿立哌唑与多巴胺D2受体激动剂作用相似，通过激动多巴胺D2受体起到抑制近视的作用，提示抑制多巴胺D2受体可能是造成小鼠近视发生发展的原因之一。
近视在近些年发病率日益增高，是临床常见的屈光不正，其发病机制复杂，但目前尚未明确。多巴胺（Dopamine，DA）是视网膜上重要的神经递质，与近视密切相关。多巴胺D2受体部分激动剂阿立哌唑(Aripiprazole，APZ)对多巴胺D2受体亲和力较强，完全激动剂缺乏时，表现出功能性激动作用，完全激动剂充足时，表现出功能性拮抗作用。本课题组前期研究发现阿立哌唑能够抑制小鼠形觉剥夺性近视（Form deprivation myopia，FDM）而不影响正常屈光发育。本实验通过比较APZ与多巴胺D2受体激动剂喹吡罗、拮抗剂舒必利对多巴胺D2受体下游信号通路的作用，模拟出APZ对近视的作用机制，从而反映多巴胺D2受体在近视发生发展中的作用机制。
方法：
本实验选取4周龄的野生型C57BL/6小鼠，将满足屈光条件的小鼠随机分成阿立哌唑药物组和多巴胺D2受体药物组。
1.免疫蛋白印迹（Western-blot，WB）实验。将阿立哌唑药物组随机分成三组：溶剂组（10％二甲基甲酰胺；n=5），低剂量阿立哌唑药物组（1mg/kg；n=5），高剂量阿立哌唑药物组（10mg/kg；n=5），每组进行持续4周的单眼形觉剥夺，并且每日腹腔注射溶剂或药物。将多巴胺D2受体药物组随机分成三组：溶剂组（抗坏血酸；n=6），多巴胺D2受体激动剂喹吡罗（Quinpirole）组（n=6），多巴胺D2受体拮抗剂舒必利（Sulpiride）组（n=6），腹腔注射药物一天。前者三个小组在实验4周结束时分别于注射药物0.5h、1h、1.5h后取材，后者三个小组在实验当天分别于注射药物0.5h、1h、1.5h后取材。所有小鼠的视网膜利用WB技术检测多巴胺D2受体下游信号分子pERK的变化情况。
2.环磷酸腺苷（cyclic adenosine monophosphate，cAMP）的提取与检测实验。将阿立哌唑药物组随机分成三组：溶剂组（10％二甲基甲酰胺；n=10），低剂量阿立哌唑药物组（1mg/kg；n=12），高剂量阿立哌唑药物组（10mg/kg；n=14），每组进行持续4周的单眼形觉剥夺，并且每日腹腔注射溶剂或药物。将多巴胺D2受体药物组随机分成三组：溶剂组（抗坏血酸；n=11），多巴胺D2受体激动剂喹吡罗（Quinpirole）组（n=14），多巴胺D2受体拮抗剂舒必利（Sulpiride）组（n=14），同样地，每组进行持续4周的单眼形觉剥夺，并且每日腹腔注射溶剂或药物。各小组在实验4周结束时分别于注射药物0.5h、1h、1.5h后取材，提取所有小鼠视网膜cAMP，利用试剂盒检测其多巴胺D2受体下游信号cAMP的变化情况。
3.电生理实验。将多巴胺D2受体药物组随机分成三组：溶剂组（抗坏血酸；n=15），多巴胺D2受体激动剂喹吡罗（Quinpirole）组（n=15），多巴胺D2受体拮抗剂舒必利（Sulpiride）组（n=12），每组进行持续2周的单眼形觉剥夺，并且每日腹腔注射溶剂或药物。实验结束时利用电生理系统生成相应的视网膜电图（Retinal Current Diagram，ERG），进而检测视网膜功能。
结果：
1.注射药物0.5h后，多巴胺D2受体激动剂喹吡罗组与溶剂组相比，pERK1明显上升（p=0.019），多巴胺D2受体拮抗剂舒必利组与溶剂组相比pERK变化不明显，但与多巴胺D2受体激动剂喹吡罗组相比，pERK1明显下降（p=0.010）。注射0.5h后溶剂组剥夺眼较对侧眼pERK2明显下降（p=0.016），高剂量阿立哌唑组剥夺眼与溶剂组剥夺眼相比pERK1明显上升（p=0.017），低剂量阿立哌唑组剥夺眼与溶剂组剥夺眼相比pERK变化不明显，各组对侧眼之间pERK变化也不明显。
2.注射药物0.5h后，多巴胺D2受体激动剂喹吡罗组与溶剂组相比，cAMP明显下降（p=0.034），多巴胺D2受体拮抗剂舒必利组与溶剂组相比cAMP变化不明显；注射0.5h后低剂量阿立哌唑组剥夺眼与溶剂组剥夺眼相比cAMP水平下降（p=0.029），各组对侧眼之间cAMP变化也不明显。
3.舒必利可以明显降低视网膜最大混合反应的a波振幅（p=0.043）和b波振幅（p=0.039），喹吡罗存在降低视网膜最大混合反应的a、b波振幅趋势。
结论：
对形觉剥夺小鼠腹腔注射阿立哌唑0.5h以及对小鼠腹腔注射喹吡罗0.5h，均可使其视网膜pERK水平升高，cAMP水平降低，多巴胺D2受体拮抗剂舒必利与激动剂喹吡罗相比，可以使视网膜pERK水平降低，这提示多巴胺D2受体部分激动剂阿立哌唑与多巴胺D2受体激动剂作用相似，通过激动多巴胺D2受体起到抑制近视的作用，提示抑制多巴胺D2受体可能是造成小鼠近视发生发展的原因之一。