葛根素拮抗高糖对血管内皮细胞损伤的作用研究

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目的:探讨(1)高浓度葡萄糖对血管内皮细胞的损伤作用,(2)葛根素对高浓度葡萄糖条件下血管内皮细胞的保护作用.方法:体外培养的人脐静脉内皮细胞株ECV304,按如下分组处理:(1)对照组(0mmol/L葡萄糖);(2)处理组1(5.5 mmol/L葡萄糖);(3)处理组2(11.1 mmol/L葡萄糖);(4)处理组3(22 mmol/L葡萄糖);(5)处理组4(33 mmol/L葡萄糖);(6)处理组5(22 mmol/L葡萄糖+0.01g/L葛根素);(7)处理组6(22 mmol/L葡萄糖+0.1g/L葛根素)(8)处理组7(22 mmol/L葡萄糖+1g/L葛根素).经培养24小时后,噻唑蓝法测定不同浓度葡萄糖和葛根素对细胞增殖的影响,比色法测定各组培养上清液中LDH浓度、MDA含量和NO的浓度,酶联免疫吸附法测定含不同浓度葡萄糖的无血清培养上清液中VEGF的浓度,免疫印迹方法检测细胞中caveolin-1、VEGF的表达,逆转录聚合酶链反应法测定各组细胞中ECE-1b mRNA的表达.结论:1. Caveolin-1和ECE-1b mRNA可介导高浓度葡萄糖诱导的血管内皮细胞损伤2.葛根素可拮抗高糖损伤的血管内皮细胞,通过下调ECE-1b mRNA和caveolin-1蛋白,上调VEGF而保护内皮细胞.从而有助于揭示糖尿病血管病变的发生机制,为糖尿病及血管病变的防治提供依据.
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