甲基转移酶METTL3-14的初步结构研究和硒多糖的材料表征与生物相容性研究

来源 :中国科学院大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xiaohengjun
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RNA上的化学修饰对基因表达起着重要的调控作用,N6-腺苷酸甲基化(m6A)被认为是最为广泛的一种修饰,它存在于真核细胞的信使RNA、长非编码RNA、转录RNA和核糖体RNA上。研究表明,m6A修饰在mRNA代谢,干细胞分化与重构,生物钟周期、以及miRNA的加工等方面都起着重要的调控作用。可逆的m6A修饰由甲基转移酶和去甲基化酶来实现,其中甲基化转移酶的催化核心为METTL3-METTL14复合体。相较于单体METTL3或METTL14,该复合体的甲基化能力有大幅度提高,对于该复合体的结构研究能够更好地为其分子机制提供解释。本文的第一部分,我们利用杆状病毒/昆虫表达系统重组表达得到完整的METTL3-14复合体,通过亲和层析、凝胶过滤层析、密度梯度离心等手段分离纯化得到纯度较高且均一性较好的蛋白复合体,并通过单颗粒电镜技术对其结构进行了初步的分析。  在本文的第二部分中,我们提出了一种新型的水溶性的由普鲁兰多糖作为支架的硒纳米粒子的合成方法。硒纳米粒子是一种纳米级的单质硒,具有优越的光电性质、高生物活性、以及低细胞毒性。但是现存的合成方法对环境污染较大,从而限制了这种硒纳米粒子的广泛应用。为解决这一问题,我们使用多糖作为模板合成硒纳米粒子,得到分散的大小均一的颗粒。同时,我们利用红外光谱以及紫外可见光谱等多种手段对多糖-硒纳米粒子的结构以及组成做了分析。最后,我们还测定了多糖-硒纳米粒子的生物相容性,发现高浓度的多糖-硒纳米粒子既能够抑制抗药菌的生长,也会导致细胞凋亡。
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