原儿茶酸对肝细胞核因子(3α、3β、4α)表达的影响的体外研究

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肝富集转录因子这个大家族组成非常复杂的调控网络,不仅能够调节肝细胞中特定基因的表达和其分化,还能调节乙肝病毒在肝细胞中的生活周期,肝细胞核因子3 α(HNF3α),肝细胞核因子3β(HNF3β)和肝细胞核因子4α(HNF4α)都是其中的重要成员,其中HNF4α是核心调节因子,不仅能发挥肝富集转录因子的作用,还能调节其他肝细胞核因子如HNF3的表达。在HepG2.215细胞中原儿茶酸(PA)能够抑制乙肝病毒(HBV)抗原的分泌和DNA复制,PA与拉米夫定(3TC)联合作用时抑制HBVX蛋白入核的效果要强于单用3TC时的效果,其中HBVX蛋白入核对HBVDNA的复制很重要,但是PA抗HBV的分子机制还不是很清楚。本论文研究了在Huh7细胞和HepG2.215细胞中PA对肝细胞核因子的影响,结果表明(1)PA(10μg/ml)对Huh7细胞增殖没有明显的抑制作用,对细胞没有毒性;PA(10μg/ml)对HepG2.215细胞的增殖不仅没有抑制,还能在一定程度上促进其增殖,而且具有时间依耐性。(2)经过G418筛选之后,只用筛选成功了的HepG2.215细胞,即能够稳定表达HBV抗原的细胞才用于后续的实验。(3)在Huh7细胞中,PA(10μg/ml)不仅能够有效的抑制HNF3α、HNF3β、HNF4α的mRNA水平,还能有效的抑制HNF4α的蛋白水平。(4)在HepG2.215细胞中PA(10μg/ml)也能够有效的抑制HNF4α的mRNA水平和蛋白水平。综上所述,在Huh7细胞中,PA能够抑制HNF3α、HNF3β、HNF4α的mRNA水平,因此我们可以推测PA可能通过作用于不同的肝细胞核因子从而影响肝细胞的分化和其特异性基因的表达,但其具体的药效作用还需要进一步的实验来探究。再者,在HepG2.215细胞中,PA能够抑制HNF4α的mRNA和蛋白水平,我们可以推测,PA可能是通过下调HNF4α在肝细胞中的水平,直接或间接的影响HBV DNA在HepG2.215细胞中的复制水平,但这一推测还需要更多的实验来验证。然而这一推测并不能解释PA与3TC联合作用时抑制HBV X蛋白入核这一现象,所以,还需要更多的科学实验进一步探究原儿茶酸抗乙肝病毒的分子机制。
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