用于固定床生物反应器的动物细胞培养新型载体的开发

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本文采用化学法对细胞培养用聚酯纤维支架进行改性处理.ATR-FTIR分析和元素分析的结果表明,聚酯纤维支架发生碱水解反应后,接枝上DEAE活性基团,并且通过扫描电子显微镜观察发现,改性处理后的聚酯纤维支架的纤维表面粗糙度得到增加. 细胞粘附实验和MTT细胞增殖实验证实,与未作改性处理的聚酯纤维支架材料相比,改性处理后的聚酯纤维支架材料对于CHO细胞生长增殖以及胞外分泌产物HBsAg有促进作用.CHO细胞在改性处理后的聚酯纤维支架材料上的电镜照片显示CHO细胞在材料上的贴壁生长时具有良好的细胞形态. 以Disk载体、未作改性处理的聚酯纤维支架为对照,CHO细胞在小型固定床上的培养实验再次证实改性处理后的聚酯纤维支架适合作为细胞固定化培养载体.Vero和293细胞均能在该聚酯纤维支架上生长. 以改性处理后的聚酯纤维支架作为细胞固定化培养载体,在固定床生物反应器灌注培养CHO细胞时,该聚酯纤维支架同样地显示出良好的细胞相容性.培养结束后,按生物反应器工作体积计算,总细胞密度为1.16×107cells/ml,细胞存活率为92.8%.产物HBsAg的最高浓度达到3.09 mg/L.
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