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NGF在生殖系统的作用已被广泛的研究和认识，本实验探索NGF对体外小鼠卵巢颗粒细胞的增殖以及激素分泌的过程的影响，研究的内容如下：1、小鼠原代卵巢颗粒细胞的培养建立了小鼠原代卵巢颗粒细胞的培养体系，利用免疫荧光检测FSHR在卵巢颗粒细胞上的表达对其进行鉴定，并对卵巢颗粒细胞的生长规律进行测定，描绘生长曲线。2、NGF及其受体TrkA在小鼠卵巢颗粒细胞的表达利用RT-PCR检测到颗粒细胞中NGF及其受体TrkA的mRNA的表达。利用细胞免疫荧光方法确定NGF及其受体在卵巢颗粒上的定位。结果发现，NGF蛋白分布在颗粒细胞的细胞膜或细胞核上，而其TrkA受体主要分布在细胞膜上。3、NGF对小鼠卵巢颗粒细胞增殖的影响为验证NGF对卵巢颗粒细胞增殖的影响，在小鼠卵巢颗粒细胞的体外培养体系中分别加入0、50、100、500ng/mL的NGF蛋白处理卵巢颗粒细胞24h，利用MTS试剂盒检测其吸光值。结果表明，实验各组与对照组相比OD值都有明显上升（p<0.05），而添加50ng/mLNGF时，颗粒细胞增殖能力显著高于对照组（p<0.01），以上结果提示NGF可以刺激小鼠卵巢颗粒细胞的增殖。4、NGF对颗粒细胞孕酮分泌的影响为进一步了解NGF对卵巢颗粒细胞的作用，设置空白对照、NGF（50ng/mL）、LH（50ng/mL）、K252（50ng/mL）、NGF+LH（50、50ng/mL）、NGF+K252（50、50ng/mL）添加到小鼠原代卵巢颗粒细胞中，利用ELISA试剂盒来检测培养液上清中孕酮的含量，结果表明：LH组与对照组相比孕酮的浓度显著升高（p<0.01），与空白对照相比，NGF对孕酮的合成也有一定促进的作用（p<0.05），添加NGF同时添加LH组与对照组有明显差异（p<0.05），但其分别与NGF组和LH组相比，差异不显著。并利用qPCR技术对各组细胞中类固醇合成酶StAR和CYP11A1的mRNA进行检测，发现添加LH组的StAR和CYP11A1的mRNA的相对表达与对照相比差异极显著（p<0.01）。添加NGF实验组与对照组相比StAR的mRNA表达差异显著（p<0.05），有促进StAR的mRNA表达的作用。添加NGF实验组与对照组相比CYP11A1的相对表达差异极显著（p<0.01），表现出抑制CYP11A1的mRNA表达。综上所述，本实验证明NGF在昆明小鼠的卵巢颗粒细胞上有表达，NGF对卵巢颗粒细胞的增殖有一定的促进作用，对孕酮的分泌影响也有一定的影响，可能是通过促进StAR的mRNA的相对表达引起的。