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目的：1.依据胶乳增强免疫比浊法的基本原理,研发出一种具有自我知识产权的β2-微球蛋白(BMG)检测试剂,为临床提供一种诊断性能好、具有价格优势的试剂。2.应用研究的β2-微球蛋白检测试剂检测糖尿病患者血清β2-微球蛋白含量并评价其应用价值。方法：1.将大小均一的胶乳和碳化二亚胺反应进行羧化,然后和商品抗体共价结合,得到免疫微球。观察免疫微球和β2-微球蛋白的反应情况,确定制备pz-微球蛋白试剂的胶乳直径、碳化二亚胺用量、β2-微球蛋白抗体用量、搅拌时间及PEG浓度的最佳条件,建立自制试剂在日立-7600分析系统下的最佳反应体系。并对成品试剂的批内、批间变异、线性范围、检出限、回收性能、抗干扰性、稳定性性能进行评价。2.采集糖尿病病人(n=150)和健康对照者(n=65)静脉血和留取糖尿病病人24小时尿液以测定血清β2-微球蛋白、尿素、肌酐以及24小时尿蛋白含量,每一实验参与者的血清β2-微球蛋白均使用自研试剂和北京利德曼试剂进行测定,依据24小时尿蛋白结果对糖尿病病人进行分组,比较各实验组血清β2-微球蛋白、尿素、肌酐水平的差异,对糖尿病肾病患者血清β2-微球蛋白与尿素、肌酐、24小时尿蛋白量进行相关性分析,并利用ROC曲线评价β2-微球蛋白诊断糖尿病肾病的效能,以探讨糖尿病患者血清β2-微球蛋白检测的临床意义。结果：1.胶乳直径为125nm,碳化二亚胺的最佳用量为8%(w/w),最佳搅拌时间为2小时,胶乳和抗体的最佳比例为4：1(w/w),PEG最佳浓度2.0%。最佳加样量为3μl,试剂1加样量为160μl,试剂2加样量为40μl,波长600nm,反应时间10分钟。低、中、高三个不同浓度的批内CV分别为3.50%、2.89%和2.68%；批间CV分别为3.39%、3.23%和3.88%；线性范围为0-19.2mg/L；最低检测限为0.2mg/L；回收率为95.00%-102.50%,平均回收率为98.98%；在血清中血红蛋白≤1Og/L、胆红素浓度<340ummol/L和甘油三酯≤10mmol/L时,对β2-微球蛋白的测定没有显著性干扰；自研试剂和利德曼试剂的相关性为0.998；试剂于4-8。C存放可稳定放置至少6个月,室温下能放置3周,37-C至少可放置7天。2.采用24小时尿蛋白作为分组依据,以24小时尿蛋白<150mg/d为界将糖尿病患者分为35例的单纯糖尿病组和115例的糖尿病并肾损害二大组,糖尿病并有肾损害组再依据24小时尿蛋白量分为24小时尿蛋白为150-1000mg/d的轻度蛋白尿组(n=52)、24小时尿蛋白为1000mg-3500mg/d的中度蛋白尿组(n=43)、24小时尿蛋白大于3500mg/d的重度蛋白尿组(n=20)。3.正常对照组、单纯糖尿病组、轻度蛋白尿组、中度蛋白尿组和重度蛋白尿组血清尿素水平分别为4.94±0.98、5.03±1.58、4.89±2.38、13.42±5.04、20.92±9.78mmol/L。五组血清肌酐水平分别为84.30±21.70、78.47±18.73、80.71±25.23、171.34±101.63、430.16-±183.72gmoI/L。五组血清β2-微球蛋白水平分别为1.68±0.71、1.62±0.83、3.51+0.81、6.71+1.12、8.46±1.85mg/L。可见糖尿病肾病中,轻度蛋白尿组血清尿素、肌酐水平与正常对照组和单纯糖尿组差异没有统计学意义,中、重度蛋白尿组血清尿素、肌酐水平才与正常对照组、单纯糖尿病组、轻度蛋白尿组差异有统计学意义(P<0.05)。而血清p2-微球蛋白在轻度蛋白尿组即开始显著升高,与正常对照组和单纯糖尿病组差异有统计学意义。糖尿病肾病患者血清β2-微球蛋白与尿素、肌酐及24h尿蛋白均呈明显的正相关关系。利用ROC曲线对各指标诊断糖尿病肾损伤的效能进行分析,结果为β2-微球蛋白对糖尿病并有肾损害组诊断的敏感性为95.90%%,尿素、肌酐对糖尿病并有肾损害组诊断的的敏感性分别为80.1%和78.1%,差异具有统计学意义(P<0.05)。β2-微球蛋白的ROC曲线下面积为0.968,尿素、肌酐的ROC曲线下面积分别为0.798和0.743(P<0.05),显示p2-微球蛋白在对糖尿病肾损害的诊断上明显优于尿素、肌酐。4.对自研试剂和利德曼试剂分别检测血清β2-微球蛋白的结果进行直线回归分析,得回归方程为Y=0.03+0.994X,r=0.999,可以认为两种试剂具有极佳的正相关(p<0.01)；其中b=0.996,a=0.01065,b接近1,a接近0,r>0.95,自研试剂可替代商品试剂使用。结论：1.成功制备了利用胶乳增强免疫比浊法原理的β2-微球蛋白检测试剂,为临床实验室提供了新的选择。2.血清β2-微球蛋白较尿素、肌酐在反映糖尿病患者的肾损害及肾损害进程方面更敏感,可辅助糖尿病肾病早期诊断和病情分期。3.β2-微球蛋白自研试剂与商品试剂具有等价的临床应用价值。