植物在生长过程要经历各种逆境，当植物受到盐害、低温、干旱等环境胁迫时，植物细胞自身会迅速积累ABA响应逆境，因此ABA是一种非常重要的逆境激素。NCED是ABA合成中的限速酶。本实验室克隆的印度酸橘基因CrNCED1受胁迫诱导，具有抗逆功能，但其转录调控机制并不清楚，因此分析CrNCED1基因启动子特有元件，研究其表达调控对阐明CrNCED1的转录调控及分离胁迫诱导启动子有至关重要的意义。　　 1.根据甜橙数据库，利用同源序列法克隆出CrNCED1基因1989 bp启动子序列。PLACE数据库分析结果显示，此段序列区域除了含有TATA盒和CAAT盒等基本元件外，还含有ABRE、MYBCORE、BIHD10S、ERELEE4、GT1GMCAM4S等与逆境密切相关的元件。它们集中分布在ATG上游的1000 bp左右。　　 2.设计引物扩增了1058 bp的启动子片段，将其连接到酶切掉CaMV35S启动子的pCAMBIA1391双元表达载体上，农杆菌介导法转化烟草，通过潮霉素筛选，，获得了烟草转基因植株。试验中发现，单纯的DNA提取，PCR鉴定并不能获得具有GUS活性的阳性植株，但是将DNA鉴定出来的植株进一步提取RNA反转录获得的cDNA进行鉴定，获得的植株一定是阳性株，通过此方法获得转基因株系#7和#8系。　　 3.进行组织特异性分析，选取转基因株系（#7、#8）进行GUS染色。结果表明，种子和果荚，没有GUS基因表达，在叶片和果蒂中有较高的GUS表达。利用震动切片和微分干涉仪进行根部染色观察，发现根中柱部位GUS表达量很高，但是在根尖和其他区域却没有表达。　　 4.对转基因株系（#7、#8）进行了脱水、ABA和甘露醇胁迫处理，发现三种处理都能促进转基因株系GUS活性，尤其是幼嫩叶片中，GUS活性明显增强。通过测定GUS荧光活性也证明启动子能够响应脱水、ABA和甘露醇。上述结果表明，该启动子是一个胁迫诱导型启动子。