前言　　大肠癌是常见消化系统恶性肿瘤，近年来大肠癌的发病率和死亡率有上升趋势，发病年龄逐渐年轻化，研究表明近十年来中国结直肠癌发病率为28.08/10万，死亡率为13.41/10万，结直肠癌在恶性肿瘤发病和死亡构成中分别占10.56％和7.80％，居第3位和第5位。大肠癌的发生、发展受遗传、环境因素及饮食结构的相互作用，其中遗传因素是一个涉及多步骤、多基因参与的复杂过程，包括癌基因的激活，抑癌基因的缺失或失活，错配修复基因的突变及危险修饰基因改变等，其中癌基因和抑癌基因的异常表达在结直肠癌的发生、发展过程中起重要作用。　　目前对于大肠癌中DCC基因表达异常及功能改变发生机制的探讨主要集中在点突变和等位基因缺失的研究，国外文献报道，DCC基因位点rs714单核苷酸多态性(SNP)与食管癌、胃癌易感性密切相关。GWAS报道多个位于8q24染色体上与大肠癌易感性密切相关的SNP位点，其中rs6983267与肿瘤发生密切相关。有研究发现，8q24上rs6983267位点的单核苷酸多态性促进C-myc基因的表达，可增强大肠癌患者体内Wnt通路的信号转导。GWAS的另一项研究发现，DCC基因位点rs7504990SNP显著增加日本人群中胆囊癌发病风险。国内外关于rs7504990位点SNP与大肠癌发病风险的相关研究尚未见报道，本研究通过Taqman探针法检测DCC基因位点rs7504990SNP并用RFLP-PCR方法检测rs6983267和rs7008482SNP，并探讨其与我国汉族人群大肠癌的遗传易感性，并就其与临床参数的相关性进行分析。　　研究方法　　1、大肠癌标本:收集中国医科大学附属第一医院2001年1月-2010年12月经病理确诊的大肠癌患者475例（男性254例，53.5％;女性221例，46.5％）;并同时收集中国医科大学附属第一院体检中心，健康体检者193例（男性105例，54.4％;女性88例，45.6％），其中健康体检者无大肠癌及其他癌症及相关病史，所有纳入研究的成员均知情同意。　　2、基因组DNA提取:采用DNA提取试剂盒提取静脉血基因组DNA，严格按照操作说明进行。DNA提取后检测DNA含量，A260/A280为1.6-2.0之间。DNA置-80℃冰箱保存。　　3、Taqman探针法:将配好实验体系避光放入Mx3000P荧光定量PCR仪，95℃，30s预变性;95℃，5s，60℃，20s，50个循环后分析实验结果。　　4、RFLP-PCR方法:将配好实验体系放入PCR仪，95℃预变性10min,95℃30s，50℃(rs7008482)，49℃(rs6983267)，72℃30s，35个循环，72℃10min。PCR产物(rs6983267-Tsp45I，rs7008482-CviQI)行酶切反应，于37℃水浴过夜(不超过16h)，5％琼脂糖凝胶电泳，凝胶成像系统分析结果。　　5、统计学分析:采用SPSS16.0统计软件处理数据，P＜0.05为有统计学意义。　　研究结果　　1、病例组和对照组基因型:我们研究发现，rs7504990位点中CC基因型与TT基因型、TC基因型及TC+TT基因型之间;rs7008482位点中GT基因型与TT基因型间以及rs6983267位点中各基因型间无明显统计学差异，其余均呈现明显统计学差异。　　2、2、病例组和对照组基因型:我们研究发现，rs7504990位点中CC基因型与TT基因型、TC基因型及TC+TT基因型之间呈显著统计学差异;rs7008482位点中TT基因型与GG基因型及GT+TT基因型间呈显著统计学差异;rs6983267位点中各基因型间无明显统计学差异，结果见表3。　　3、本研究对病例组内其他临床特征与基因型之间也进行了统计学分析，其中rs6983267位点与病例组吸烟史及癌症家族史呈现明显统计学差异;rs7008482位点与病例组肿瘤大小、Dukes分期及淋巴结转移呈现明显统计学差异;rs7504990位点与病例组各临床指标未见明显统计学差异，其中具有统计学差异者进行logistic回归分析。　　4、最后，本研究将上述三个位点就其野生型与突变型进行统计分析，对照组中三位点野生型计数为零，因此，我们只将其与各临床指标进行统计分析，其中，肿瘤分化程度高低及有无吸烟史间存在明显统计学差异。　　讨论　　本研究提示DCC基因位点rs7504990SNP可显著增加我国汉族大肠癌发病风险，其中TC、TT、TC+TT等基因型与CC基因型比较均呈现显著统计学差异，rs7008482位点亦可显著增加我国汉族大肠癌发病风险，其中TT基因型与GG基因型及GT+TT基因型间呈显著统计学差异。在我国汉族人群中，rs7008482位点增加吸烟人群大肠癌患病率;亦可增加有癌症家族史者大肠癌的发病风险。rs7008482位点SNP与大肠癌Dukes分期显著相关，且此位点的单核苷酸多态性的大肠癌患者较易发生淋巴结转移。三位点SNP联合检测，rs7504990TC+TT-rs6983267GT+TT-rs7008482GT+GG可大大增加吸烟者大肠癌的发病风险，并结合临床其他检查手段，可提高无癌症家族史人群中大肠癌筛查及基因治疗的准确率，在临床诊治及预防中更具意义。　　研究结论　　1、SNP位点rs7504990、rs7008482可显著增加我国汉族人群大肠癌易感性。　　2、在我国汉族人群中，rs6983267SNP可显著增加吸烟人群大肠癌患病率;亦可增加有癌症家族史者大肠癌的发病风险。　　3、在我国汉族人群中，rs7008482位点SNP与大肠癌Dukes分期显著相关，且此位点的单核苷酸多态性的大肠癌患者较易发生淋巴结转移。　　4、在我国汉族人群中，本课题的三位点联合检测发现，以上三位点SNP可大大增加吸烟者大肠癌的发病风险。