模拟根系分泌物对硝化反硝化基因丰度的影响

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本实验通过采用人工林和盆栽土壤,探讨南方红壤坡地人工林生态系统土壤细菌群落结构与丰度的季节变化特征,以湿地松林和油茶林土壤作为研究对象,在两年的时间里分季节采集土壤样品,利用荧光定量PCR(qPCR)分析土壤细菌的丰度,末端限制性酶切片段长度多态性(T-RFLP)分析土壤细菌的群落结构。油茶林土壤含水量、铵态氮和DOC含量,结果显示土壤细菌丰度均显著高于湿地松林土壤,且油茶林和湿地松林土壤细菌群落结构也产生明显分异。随季节变化土壤细菌丰度和土壤理化性状产生波动,但年际间的变化规律不一致。两林地土壤四季共有物种占绝对优势,群落结构季节变化不明显。油茶林土壤细菌丰度与土壤含水量正相关,土壤养分含量如土壤硝态氮、铵态氮和DOC含量与土壤细菌群落结构密切相关。树种不同而诱导的土壤养分状况的变化是调控土壤细菌群落结构的关键因子。本文依托桃源农业生态试验站不同坡地利用方式长期定位试验,选择湿地松和油茶林2种利用方式,在2年时间内分不同季节采集土壤样品。利用荧光定量PCR分析土壤细菌数量的差异,利用末端限制性酶切片段长度多态性分析(T-RFLP)技术分析土壤细菌的群落结构对人工林树种和季节变化的响应。从土壤微生物学角度评价不同造林树种对土壤肥力和生态环境质量的影响,以期为中国南方酸性红壤丘陵区生态修复造林树种的选择提供理论依据和参考。与此同时,通过盆栽实验模拟秋季根系分泌物,制定四种不同处理(不施肥对照;施氮肥不施碳源对照;葡萄糖加氮肥;草酸加氮肥),以模拟根系模型中根际土与非根际土壤样品为研究对象,运用现代分子生物学技术研究长期施加碳源对红壤旱地土中16s rDNA,亚硝化基因amoA和反硝化基因nirK,nirS,nosZ I基因丰度的影响。结果显示,在长期培养条件下,施加碳源处理后,硝化和反硝化多样性基因的影响有所不同。在红壤旱地土中,长期施加碳源降低了上述所有基因的基因丰度,但在根际与非根际土和不同碳源的处理间略有差异。总体来说,长期添加碳源处理不同程度地改变了16s rDNA,亚硝化基因amoA和反硝化基因nirK,nirS,nosZ I的基因丰度和群落结构。研究发现,农田土壤中硝化过程不同基因数量古菌amoA>细菌amoA。反硝化过程不同基因的数量为nirK+nirS>nosZ I,总量占16s rDNA的比例为10%左右。研究还发现,随着土壤离模拟根系的距离增加,土壤中残留NO3-,DOC含量也增加,而NH4+含量的变化趋势不明显。N2O在排放初期较高,两天之后变低并逐渐稳定,也证实了添加碳源之后,培养初期土壤中硝化反硝化强度增强,之后因为土壤本底的限制,抑制了微生物的活性。
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