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目的:研究气体信号分子硫化氢（Hydrogen Sulfide,H2S）对硫酸铍（Beryllium sulfate,BeSO4）诱导人支气管上皮细胞（Human Bronchial Epithelial Cells,16HBE）自噬的影响及其相关调控机制,为进一步探讨硫酸铍的毒性机制提供依据。方法:1、不同浓度BeSO4（0、100、150、200、250和300μmol/L）处理16HBE细胞48 h后,用MTT法检测细胞活力、显微镜下观察细胞形态改变;亚甲基蓝分光光度法检测细胞内H2S含量;免疫印迹法（Western Blot）检测自噬相关蛋白LC3、Beclin-1、P62的表达水平,间接免疫荧光观察LC3-B荧光斑点分布情况;透射电子显微镜观察细胞内超微结构。2、分别用0.1μmol/L自噬激活剂雷帕霉素（Rapamycin,Rapa）和50μmol/L自噬抑制剂氯喹（Chloroquine,CQ）预处理16HBE细胞2 h后再与150μmol/L BeSO4共处理48 h,检测细胞活力和LC3、Beclin-1、P62的表达水平。3、用300μmol/L H2S供体硫氢化钠（Sodium Hydrosulfide,NaHS）和10 mmol/L H2S合成酶胱硫醚-γ-裂解酶（CSE）抑制剂DL-炔丙基甘氨酸（DL-Propargylglycine,PPG）分别预处理16HBE细胞6 h,更换新鲜培养基后再用150μmol/L BeSO4处理48 h,检测16HBE细胞活力和细胞形态、H2S含量,Western Blot检测LC3、Beclin-1、P62、PI3K、t-Akt、p-Akt、mTOR和CSE蛋白的表达水平,用间接免疫荧光观察LC3-B荧光斑点分布情况。结果:1、与对照组比较,随着BeSO4染毒剂量的增加,16HBE细胞活力、H2S含量和自噬相关蛋白P62蛋白的表达均降低（P<0.05）,LC3-II、Beclin-1的表达增加（P<0.05）;BeSO4作用16HBE细胞48h的半数抑制浓度为249μmol/L;镜下可见BeSO4处理后细胞形态发生改变,细胞形态不规则、原有的上皮样形态丧失,且随着BeSO4染毒剂量增加16HBE细胞形态改变越明显;BeSO4染毒组的16HBE细胞胞质中LC3-B斑点明显增多、部分融合呈斑块状,透射电子显微镜观察16HBE细胞内自噬体数量增加。2、与BeSO4处理组比较,CQ+BeSO4联合处理组16HBE细胞的自噬蛋白LC3-II和Beclin-1表达下调、P62的表达上调、细胞活力增加（P<0.05）;Rapa+BeSO4联合处理组16HBE细胞中LC3-II和Beclin-1蛋白表达上调、P62表达下调、细胞活力降低（P<0.05）。3、与BeSO4处理组比较,NaHS+BeSO4组16HBE细胞活力增加、细胞形态改变好转、P62蛋白表达上调（P<0.05）、LC3和Beclin-1蛋白表达有下降趋势但差异无统计学意义,LC3-B荧光斑点减少;PPG+BeSO4组16HBE细胞活力降低（P<0.05）、细胞形态改变更严重、LC3和Beclin-1蛋白表达上调、P62蛋白下调（P<0.05）、LC3-B荧光斑点增多。4、与对照组比较,BeSO4染毒组16HBE细胞中CSE、PI3K、p-Akt及mTOR蛋白均下调（P<0.05）;与BeSO4染毒组比较,NaHS+BeSO4组16HBE细胞中CSE、PI3K、p-Akt及mTOR蛋白表达明显上调（P<0.05）;PPG+BeSO4组与BeSO4染毒组相比16HBE细胞中各蛋白表达均下调（P<0.05）。结论:1、BeSO4能对16HBE细胞造成损伤、减少细胞内H2S含量,并引起16HBE细胞自噬过度发生。2、氯喹能通过抑制自噬减缓BeSO4对16HBE细胞的损伤效应。3、H2S能发挥信号分子的作用激活PI3K/Akt/mTOR通路抑制BeSO4诱导的16HBE细胞自噬、减轻细胞的损伤效应。