【摘 要】
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目的:研究黄芩和苍术对脾胃湿热证和湿阻中焦证证候模型的干预作用,阐明两种证候模型的本质,进一步说明黄芩和苍术性效的关联性,丰富中药药性的内涵。方法:64只雄性健康SD大鼠随机分为空白组、模型组、黄芩高剂量组、黄芩中剂量组、黄芩低剂量组、苍术高剂量组、苍术中剂量组和苍术低剂量组。1.制作脾胃湿热证大鼠模型采用内服高脂高糖饮食和外部湿热环境双重作用复制脾胃湿热证模型。造模20天给药7天。2.观察黄芩和
【基金项目】
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广西中药药效研究重点实验室系统性研究课题项目（17-259-20-A7）; 中药学广西一流学科（桂教科研[2018]12号）
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目的:研究黄芩和苍术对脾胃湿热证和湿阻中焦证证候模型的干预作用,阐明两种证候模型的本质,进一步说明黄芩和苍术性效的关联性,丰富中药药性的内涵。方法:64只雄性健康SD大鼠随机分为空白组、模型组、黄芩高剂量组、黄芩中剂量组、黄芩低剂量组、苍术高剂量组、苍术中剂量组和苍术低剂量组。1.制作脾胃湿热证大鼠模型采用内服高脂高糖饮食和外部湿热环境双重作用复制脾胃湿热证模型。造模20天给药7天。2.观察黄芩和苍术对脾胃湿热证大鼠胃肠组织形态的影响使用HE染色法,光镜下观察胃和结肠组织的形态学变化。3.观察黄芩和苍术对脾胃湿热证大鼠炎症免疫功能的影响ELISA法检测大鼠血清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-4（IL-4）和干扰素-γ（IFN-γ）含量。4.观察黄芩和苍术对脾胃湿热证大鼠水液代谢功能的影响蛋白质印迹法（Western blot）检测水通道蛋白-3（AQP3）、水通道蛋白-4（AQP4）和水通道蛋白-8（AQP8）蛋白含量表达;实时荧光定量聚合酶链式反应法（Real-time PCR）检测AQP3、AQP4和AQP8 m RNA表达。5.制作湿阻中焦证大鼠模型采用饱食内服油脂、饥时灌胃冰水和外部寒湿环境综合因素制备湿阻中焦证模型。造模20天给药7天。6.观察黄芩和苍术对湿阻中焦证大鼠胃肠组织形态的影响使用HE染色法,光镜下观察胃和结肠组织的形态学变化。7.观察黄芩和苍术对湿阻中焦证大鼠胃肠功能的影响胃液游离酸度测定方法检测胃液酸度;胃蛋白酶活性测定方法测定胃蛋白酶活力。8.观察黄芩和苍术对湿阻中焦证大鼠水液代谢功能的影响Western blot法检测AQP3、AQP4和AQP8蛋白含量表达;Real-time PCR法检测AQP3、AQP4和AQP8 m RNA表达。结果:1.黄芩和苍术对脾胃湿热证大鼠胃肠组织形态和炎性因子的影响病理切片结果显示脾胃湿热证大鼠胃、结肠组织炎症反应明显,血清中IFN-γ、IL-4和TNF-α含量升高（P＜0.05）。黄芩和苍术各剂量组均能降低血清中IFN-γ、IL-4和TNF-α的含量（P＜0.05或P＜0.01）,苍术对结肠组织炎症有一定治疗作用但对胃组织炎症治疗作用不明显,黄芩对胃和结肠组织炎症治疗效果佳。2.黄芩和苍术对脾胃湿热证大鼠水液代谢功能的影响与模型组比较,黄芩组和苍术组胃组织中AQP4蛋白表达量降低（P＜0.01）,各组结肠组织中AQP8蛋白表达降低（P＜0.05或P＜0.01）,其中黄芩中剂量组、苍术中剂量组和苍术低剂量组结肠组织中AQP3蛋白表达量降低（P＜0.05）。黄芩和苍术对脾胃湿热证大鼠胃和结肠组织中AQP3、AQP4和AQP8 m RNA表达的调控作用不明显。3.黄芩和苍术对湿阻中焦证大鼠胃肠组织形态和胃肠功能的影响病理切片结果显示湿阻中焦证大鼠胃和结肠组织有炎症反应。该模型大鼠胃液中游离酸度降低（P＜0.05）,且胃蛋白酶活力减弱（P＜0.05）,苍术治疗可升高胃液游离酸度（P＜0.05）,增强胃蛋白酶活力（P＜0.05）。4.黄芩和苍术对湿阻中焦证大鼠水液代谢功能的影响在湿阻中焦证大鼠结肠组织中,苍术各剂量组AQP3蛋白表达量减少,差异显著（P＜0.01）,可下调结肠组织中AQP3蛋白表达。黄芩和苍术对胃组织中AQP3、AQP4和AQP8蛋白表达、胃和结肠组织中AQP3、AQP4和AQP8 m RNA表达的调控作用不明显。结论:1.苦寒燥湿药治疗湿热证的药性和药效存在明显相关性。2.苦温燥湿药治疗寒湿证的药性和药效存在明显相关性。3.脾胃湿热证和湿阻中焦证证候模型造模方法确切可靠。
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