杭白菊(Chrysanthemum Morifolium Ramat)属于菊科草本植物头状花序,是我国传统的多年生药用和饮用菊花,具有抗氧化、抑肿瘤、延缓衰老等多种生物活性和巨大的资源优势。杭白菊花药理有效成分主要是多糖及黄酮类小分子(包括刺槐素、木犀草素、槲皮素、橙皮素、杨梅黄素、芹菜素等)。目前,关于菊花多糖抗氧化性评价的研究较少,对其黄酮提取工艺的研究缺乏系统性,并且将菊花黄酮提取物抗氧化活性与其化合物含量相关性的研究也鲜有报道。为了天然植物抗氧化剂的开发利用,本文对杭白菊花的有效活性成分提取及其抗氧化作用进行研究,找出菊花HPLC-UV色谱指纹图谱与抗氧化活性的相关性,对杭白菊花的谱效关系进行初探,研究如下:1、响应面法优化菊花粗多糖提取工艺以菊花提取物粗多糖得率作为参考指标,确定了水提法为菊花粗多糖的提取工艺;通过单因素试验及响应面优化法,并结合实际操作考虑,确定菊花多糖提取的最佳工艺条件是:提取温度=85℃,提取时间=3h,醇沉终浓度=80%,液料比=25:1(ml/g)(固定条件为:粉碎度60目,水提法,提取3次,pH值为7.0)。2、优化工艺提取菊花粗多糖抗氧化活性研究响应面法优化水提工艺所得的菊花粗多糖对各种自由基(DPPH·、O2·-、.OH、ABTS’+)均具有一定的清除能力,并且在一定浓度范围内,其抗氧化作用与浓度呈现正相关。3、菊花黄酮提取工艺的确定以菊花黄酮得率和DPPH清除能力作指标,黄酮得率大小依次为:甲醇提取工艺>95%乙醇提取工艺(原有工艺)>70%乙醇提取工艺>沸水提取工艺>丙酮提取工艺>乙酸乙酯提取工艺;清除DPPH·能力大小依次为:甲醇提取工艺>70%乙醇提取工艺>95%乙醇提取工艺(原有工艺)>沸水提取工艺>丙酮提取工艺>乙酸乙酯提取工艺,且黄酮提取物在一定浓度范围内,其DPPH·清除能力与含量之间存在线性正相关。结合试剂环保性、提取成本等因素综合考虑,得出菊花黄酮的理想提取工艺为70%乙醇提取工艺。4、菊花黄酮提取物HPLC-UV指纹图谱及抗氧化性研究本试验在设定色谱条件下,采用标品作对照,检测了 30批杭白菊花样品黄酮提取物的指纹图谱,标定了 6个共有峰并定性鉴别出这6个化合物分别是:槲皮素、橙皮素、刺槐素、杨梅黄素、木犀草和芹菜素;同时,建立这六种黄酮类化合物含量的高效液相色谱-紫外检测器法,方法学验证良好;根据所建立的方法测定出不同批次菊花黄酮活性物质的含量,为菊花的进一步研究和开发奠定良好的基础。试验采用DPPH清除法测定30批次杭白菊花样品黄酮提取物的抗氧化活性,结果表明:它们具有较强的抗氧化活性,且不同批次的杭白菊花抗氧化活性有差异。5、菊花指纹图谱与抗氧化作用的谱效分析结合HPLC-UV法制备的杭白菊花黄酮指纹图谱及其抗氧化作用测定,运用灰关联模型计算出黄酮各色谱峰与抗氧化性之间的灰关联度,并且通过逐步多元回归统计方法分析,得出对抗氧化作用有统计学意义(P<0.05)的峰以及它们对抗氧化性的贡献程度。综合以上两种方法可以分析出菊花黄酮指纹图谱与抗氧化活性之间的谱效关系。