东北红豆杉组织培养及紫杉醇含量分析

来源 :延边大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:mythology_leonie
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本实验主要研究了不同基本培养基和不同激素种类组合之间对东北红豆杉不同性别叶片愈伤组织诱导的影响以及离体胚培养和不同材料紫杉醇含量分析,结果发现,最适合于东北红豆杉愈伤组织诱导的基本培养基为WPM培养基,其次是B5培养基,常用的MS培养基的诱导效果一般,但是MS与生长素2,4-D组合培养基的愈伤组织诱导效果很好,诱导率在80%以上;适合于东北红豆杉愈伤组织诱导和培养的生长素为2,4-D和NAA,其中2,4-D在MS培养基中的诱导效果明显好于NAA的诱导效果,在MS培养基中2,4-D浓度为3.0mg/L或1.5mg/L时的诱导效果较好,NAA在B5培养基中的诱导效果微优于2,4-D的诱导效果,在B5培养基中NAA浓度为2.0mg/L时的诱导效果最好,最高诱导率达81.67%;细胞分裂素6-BA不利于诱导东北红豆杉愈伤组织,而KT有利于愈伤组织的诱导。  在东北红豆杉离体胚的培养中,种胚最佳萌发培养基为BM+0.05mg/L6-BA+0.1mg/L2,4-D+0.1g/LLH+4g/LAC;流水冲洗种子9天为好,其中冷冻过1天的种子种胚有利于诱导愈伤组织,未冷冻的种子种胚有利于形成完整的苗。  东北红豆杉不同材料的紫杉醇含量分析中,东北红豆杉愈伤组织的紫杉醇含量很高,达到枝叶紫杉醇含量的2.5~3倍。  对于不同性别而言,MS和B5基本培养基对雄性叶片的诱导效果较好,改良MS和 WPM基本培养基对雌性叶片的诱导效果较好,在四种基本培养基上雌雄之间的愈伤组织诱导率显示出平均10%左右的差异;生长素NAA和2,4-D和细胞分裂素6-BA均有利于诱导雄性叶片的愈伤组织,而不同浓度KT对于不同性别的诱导作用不同,附加0.1mg/L或1.0mg/LKT的MS培养基中雌性叶片的诱导效果显著,附加0.5mg/LKT的MS(或B5)培养基中雄性叶片的诱导效果显著;雌性枝叶紫杉醇含量高出雄性枝叶紫杉醇含量约6%,雌性叶片诱导出的愈伤组织紫杉醇含量比雄性叶片诱导出的愈伤组织紫杉醇含量高出约27%。
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