【摘 要】
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鼠李糖脂是一种广泛应用的生物表面活性剂,其能有效地治理石油污染、有机物污染、重金属污染等环境问题,但目前野生菌株生产鼠李糖脂的能力较弱,因此筛选高产鼠李糖脂菌株显得尤为重要。本论文从餐饮废油老化土壤中筛选获得三株鼠李糖脂生产菌,从形态学、生理生化和分子生物学对菌株进行鉴定,利用单因素实验、PB实验和响应面实验优化菌株发酵条件,同时初步探究菌株在石油降解、植物油乳化和农业致病菌防治三个方面的应用,具
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鼠李糖脂是一种广泛应用的生物表面活性剂,其能有效地治理石油污染、有机物污染、重金属污染等环境问题,但目前野生菌株生产鼠李糖脂的能力较弱,因此筛选高产鼠李糖脂菌株显得尤为重要。本论文从餐饮废油老化土壤中筛选获得三株鼠李糖脂生产菌,从形态学、生理生化和分子生物学对菌株进行鉴定,利用单因素实验、PB实验和响应面实验优化菌株发酵条件,同时初步探究菌株在石油降解、植物油乳化和农业致病菌防治三个方面的应用,具体实验结果如下:（1）使用CTAB-亚甲基蓝平板从环境样品中筛选获得三株鼠李糖脂生产菌,分别编号为CT4、CT5和CT7,硫酸蒽酮法测定其产量分别为7.43 g/L、8.02 g/L、7.46 g/L。（2）利用形态学、生理生化、16S r DNA及gyr B基因鉴定发现,CT4为肺炎克雷伯氏菌（Klebsiella quasipneumoniae）,G-菌,菌体呈短杆状,不产芽孢,菌落呈圆形,灰白色,不透明,菌落表面粘稠,边缘整齐;CT5和CT7为铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）,G-菌,菌体杆状,不产芽孢,菌落呈圆形,灰绿色,不透明,菌落表面湿润,边缘不整齐,有刺鼻性气味。功能基因鉴定发现CT4含有rhl R、rhl C两种与鼠李糖脂合成相关的基因,CT5和CT7含有rhl A、rhl B、rhl AB、rhl R、rhl C五种与鼠李糖脂合成相关的基因。（3）优化实验确定CT4的最佳发酵条件（L）为:玉米油9.899%,Na NO3 10.532g,Na2HPO4 1.2 g,KH2PO4 0.4 g,Mg SO40.9 g,Ca Cl2 0.1 g,微量元素溶液1 m L,接种量为3%,初始p H值7.916,发酵72 h理论产量为24.323 g/L,实测产量为24.014 g/L,产量是优化之前的3.23倍;CT5的最佳发酵条件（L）为:豆油6%,Na NO3 8.249 g,Na2HPO4 1.165 g,KH2PO4 0.389 g,Mg SO4 0.3 g,Ca Cl2 0.1 g,微量元素溶液1 m L,接种量为2%,初始p H值为7.095,发酵72 h理论产量为25.551 g/L,实测产量为25.146g/L,产量是优化之前的3.14倍;CT7的最佳发酵条件（L）为:玉米油8%,Na NO39.841 g,Na2HPO4 0.4 g,KH2PO4 1.2 g,Mg SO4 0.3 g,Ca Cl2 0.1 g,微量元素溶液1 m L,接种量为2.174%,初始p H值为6.436,发酵72 h理论产量为22.025 g/L,实测产量为22.253 g/L,产量是优化之前的2.98倍。（4）应用实验发现CT4、CT5和CT7菌株接种到含石油的培养基中摇床72 h后,其石油降解率分别为41.8%、43.5%和31.3%;CT4、CT5和CT7菌株的代谢产物对玉米油的乳化评级为良好,乳化系数分别为60%,53%和66%;农业致病菌防治研究中CT5能够抑制尖孢镰刀菌（Fusarium oxysporum）,立枯丝核菌（Rhizoctonia solani）,麦根腐平脐蠕孢菌（Bipolaris sorokiniana）,葡萄座腔菌（Botryosphaeria dothidea）,整齐小核菌（Sclerotium rolfsii）的生长,CT4和CT7对农业致病菌无抑制效果。
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