应用表面增强激光解析电离飞行时间质谱技术筛选鼻咽癌血清生物标志物及建立诊断模型的研究

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研究目的:从弱阳离子交换CM10芯片、金属亲和吸附IMAC-Cu芯片、疏水H50芯片和强阴离子交换Q10芯片四种芯片中选择适用于鼻咽癌患者血清蛋白质指纹图谱研究的芯片种类。分析比较鼻咽癌患者和健康人之间的血清蛋白质表达差异并建立诊断模型,为鼻咽癌的早期诊断提供新的更为简便的方法。方法:(1)选择4例鼻咽癌患者和4例健康人血清样本,采用CM10、IMAC-Cu、H50和Q10四种芯片结合表面增强激光解析电离飞行时间质谱技术进行检测,分析比较四种芯片结合蛋白质的效果。(2)选择24例鼻咽癌患者和24例健康人血清标本,采用CM10芯片结合表面增强激光解析电离飞行时间质谱技术进行检测。由Biomarker Wizard software获取质谱数据、统计分析和筛选鼻咽癌相关差异蛋白质。由Biomarker Pattern software建立诊断模型,并随机选择32例血清样本对诊断模型进行盲法验证。结果:(1)血清蛋白质指纹图谱显示CM10芯片结合蛋白的效果较其他三种芯片好,因此选择CM10芯片筛选差异蛋白质和建立诊断模型。(2) Biomarker Wizard软件在CM10芯片上共检测到蛋白质质谱峰94个,有显著差异的26个,其中有5个表达上调,21个表达下调。在所有质谱峰中选择M/Z 3159.83、5187.65、13738.6用于建立诊断模型。在训练集(training)中诊断模型区分鼻咽癌患者和健康者的灵敏度为91.66%,特异度为95.83%;在学习集(learning)中本模型区分鼻咽癌患者和健康者的灵敏度为87.5%,特异度为95.83%;在盲法验证中该模型区分鼻咽癌患者和健康者的准确率为90.63%,灵敏度为95.00%,特异度为83.33%。结论:(1)每种芯片均能结合不同性质的血清蛋白质,CM10芯片结合蛋白质的效果较好。(2)鼻咽癌患者和健康人血清蛋白质指纹图谱存在差异。(3)表面增强激光解析电离飞行时间质谱技术是比较理想的进行疾病血清差异蛋白质筛选研究的平台。
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