葡萄（Vitis）是全世界最重要的果树之一。病毒病是制约鲜食葡萄和酿酒葡萄发展的重要因素。葡萄卷叶病(Grapevine leafroll disease, GLD)在世界葡萄产区广泛发生，是危害葡萄生产最为严重的病毒病害之一。干旱在世界葡萄产区，尤其是我国的西北优质葡萄主产区广泛发生。因此，病毒病害与干旱的双重胁迫一直是世界葡萄生产面临的难题。本研究利用PEG诱导的干旱胁迫，建立了快速、高效的葡萄试管苗葡萄卷叶病毒-3（Grapevine leafroll-associated virus-3, GLRaV-3）的指示植物检测技术；研究了GLRaV-3带毒葡萄试管苗在PEG诱导的干旱胁迫下，花色苷含量和种类及与花色苷生物合成相关基因的表达；研究了GLRaV-3带毒葡萄试管苗在PEG诱导的干旱胁迫下的营养生长、生理代谢、激素水平变化及相关基因的表达；同时利用三种嫁接方法评价了几种葡萄砧木对葡萄卷叶病毒-1（GLRaV-1）的耐性。获得的主要研究结果如下：　　（1）利用PEG诱导的干旱胁迫，建立了葡萄红色品种试管苗快速、高效的GLRaV-3指示植物检测方法。将单一感染GLRaV-3的欧洲葡萄‘赤霞珠’（Vitis vinifera‘Cabernet Sauvignon’）试管苗分别培养在含有0%、2%和4%的PEG培养基上，试管苗分别在14、14和6 d后开始出现卷叶病毒的明显症状；经4 w的胁迫培养后，症状的表达率分别有8%、61%和81%。将4%的PEG胁迫应用到其它感染GLRaV-3的葡萄砧木‘6-12-2’（ V. pseudoreticulata× V. vinifera），鲜食品种‘红地球’（V. vinifera‘Red Globle’）和‘巨峰’（V. vinifera× V. labrusca‘Kyoho’），培养4 w后，卷叶病毒症状表达率分别是100%，72%和60%。上述结果表明，PEG诱导的干旱胁迫能够快速、有效的促进葡萄红色品种试管苗的GLRaV-3症状表达。　　（2）利用高效液相色谱检测了GLRaV-3带毒‘赤霞珠’（ V. vinifera‘Cabernet Sauvignon’）试管苗在PEG诱导的干旱胁迫下的花色苷含量和种类，并且运用荧光定量PCR分析了花色苷合成相关基因的表达水平。带毒试管苗叶片中明显地检测到11种不同的花色苷，PEG诱导的干旱胁迫明显提高带毒试管苗叶片花色苷含量；花色苷含量的积累导致带毒试管苗叶片显示颜色，表现出明显的卷叶病毒症状。GLRaV-3感染和PEG诱导的干旱胁迫都能不同程度的上调花色苷合成相关基因的表达，其中，MYBA1和UFGT的表达只有在GLRaV-3感染的条件下才能被激活。方差分析和相关性分析花色苷含量的积累和基因的表达水平发现，GLRaV-3感染是导致带毒试管苗叶片花色苷积累的关键因素，MYBA1和UFGT是两个关键基因。试管苗感染GLRaV-3后，MYBA1和UFGT的表达被激活，导致了花色苷合成的增加和叶片中花色苷含量的积累，而PEG胁迫能够增强这一效果。　　（3）单一的GLRaV-3感染或PEG诱导的干旱明显抑制葡萄‘赤霞珠’（V. vinifera‘Cabernet Sauvignon’）试管苗的营养生长；病毒与PEG诱导的干旱双重胁迫加剧这种抑制作用；GLRaV-3感染显著地降低叶片的叶绿素含量与叶片的光合潜能，引起叶片可溶性总糖、总蛋白以及游离脯氨酸含量的变化，导致根部细胞膜的通透性改变与死细胞数目的增加，叶片的MDA、O2·-和H2O2均明显增多，病毒与PEG诱导的干旱双重胁迫加剧上述反应。PEG胁迫明显地增加带毒试管苗叶片POD、CAT和SOD的活性， GLRaV-3单独感染对过氧化物酶活性没有显著的影响；而GLRaV-3与PEG诱导的干旱的双重胁迫极大地增加氧化物酶活性。PEG诱导的干旱胁迫或GLRaV-3感染均能增加试管苗叶片的ABA含量，降低IAA的含量，双重胁迫对ABA和IAA含量的影响更显著；ABA合成相关基因表现出上调，而IAA合成相关基因表现为下调；双重胁迫对激素的含量及合成相关基因表达的影响更明显。　　（4）利用试管嫁接（in vitro grafting）、绿枝嫁接(green grafting)和硬枝嫁接(bench grafting)3种不同嫁接方法对4种美国葡萄生产上常用的砧木对卷叶病毒的耐性进行评价。结果表明，在试管嫁接中，带毒LR132株系（V. vinifera‘Cabernet Franc’）与所有砧木组合均不能成活，带毒LR131株系（V. vinifera‘Cabernet Franc’）和无毒Franc株系（V. vinifera‘Cabernet Franc’）与不同砧木组合的成活率均在80%以上，但不同砧穗组合间没有显著差异。LR131/‘Freedom’（V. champinii×1613C）和LR131/‘101-14’(V. riparia× V. ruprestris）组合时，芽萌发时间和根形成的时间明显推迟，接穗的营养生长和砧木根的生长受到显著的抑制。组织学观察发现，LR132明显推迟嫁接部位愈伤组织形成，接穗与砧木间不能形成维管组织，从而导致嫁接苗死亡。LR131和‘Franc’与所有砧木组合的愈伤组织形成与维管束形成相似。试管嫁接8 w后，在不同砧/穗组合中，‘AXR’（V. vinifera× V. rupestris）砧木中的GLRaV-1含量最高，‘Freedom’的GLRaV-1的含量最低。在绿枝嫁接中，‘AXR’作为砧木的嫁接组合成活率最低，LR132和LR131嫁接到‘AXR’上的成活率与Franc没有显著差别；LR132嫁接到‘Freedom’和‘101-14’上的成活率显著的低于Franc和LR131在‘Freedom’和‘101-14’上的成活率；Franc、LR131和LR132嫁接到‘St. George’（V. rupestris）上均表现出较高成活率；LR131和LR132嫁接到‘Freedom’和‘101-14’上均表现出严重的卷叶病毒症状，LR132的卷叶病毒症状较LR131更为严重；LR131和LR132嫁接在‘St. George’和‘AXR’上均呈现轻微的卷叶病毒症状。LR131在4种砧木上嫁接部位GLRaV-1的含量没有差别，LR132嫁接部位的GLRaV-1和GVA含量在‘St. George’上最高，在‘101-14’上最低；在硬枝嫁接中，Franc在4种砧木上的嫁接成活率极高，均在95%-100%之间，LR131的成活在不同的砧木上没有明显差别，约为78%。 LR132在‘St. George’上的嫁接成活率较高，移栽到田间成活率高达95%，而在‘Freedom’和‘101-14’上的嫁接成活率很低，移栽田间成活率分别是0%和27%。综上所述，嫁接方法、接穗感染的病毒株系和不同的砧木均影响嫁接的成活率，而且两两之间均有互作，卷叶病毒的耐病性‘St. George’最高，‘AXR’较高，而‘Freedom’和‘101-14’则对卷叶病毒敏感，研究结果对葡萄生产嫁接砧木的选择具有很重要的参考价值。　　本研究建立了快速、高效的葡萄红色品种葡萄卷叶病-3的检测技术；揭示了PEG诱导的干旱胁迫促进葡萄卷叶病-3症状表达的机理；明确了葡萄卷叶病-3和PEG诱导的干旱胁迫（单一胁迫和双重胁迫）对葡萄的营养生长、生理代谢、激素含量及相关基因的表达都有明显的影响。这些结果为防控葡萄卷叶病毒，调整农业技术实现葡萄生产的持续发展提供了依据。同时，不同葡萄接穗/砧木组合对葡萄卷叶病耐性的评价为耐病砧木筛选提供了参考。