论文部分内容阅读
研究背景及目的:在海战及登陆作战中,四肢开放伤是最常见的伤型,常伴有海水浸泡。各种海难事故、海上飞行失事、潜水作业、潜艇脱险,及海上钻井平台事故等客观条件,人员难免不遭受海水浸泡伤,尤其是肢体浸泡伤。海水温度低,含氯化钠0.53～0.58 mol/L(3l～34 g/L),pH 8.0～8.21,属高渗、强碱性液体,具有特殊的理化性质,同时含有近20种对人体有明显致病作用的细菌。开放性骨折合并海水浸泡时感染率增高,骨痂生成延迟,骨痂形成不良,愈合过程延迟,骨折愈合强度明显低于对照组。骨膜在骨发生及生长过程中起着重要作用,骨膜成骨功能主要在于骨膜的生发层,具有骨折愈合所需的细胞。本课题从动物实验角度研究海水浸泡开放性软组织损伤对骨膜的影响。本实验以兔肢体软组织开放性损伤合并海水浸泡伤为实验模型,取骨膜做组织学观察及检测伤肢骨膜中相关细胞因子表达情况,探讨海水浸泡对长骨干骨膜的影响及发生机制,以期为海水浸泡开放性损伤的相关临床治疗提供理论依据。研究方法与内容:建立兔双后肢软组织开放性损伤和海水浸泡伤动物模型,观察干预结束后不同时间(0d、1d、3d、7d)实验动物创伤侧肢体骨膜病理学改变,通过HE染色比较海水浸泡与否时的骨膜变化,并运用免疫组化染色方法观察和比较骨形态发生蛋白(BMPs)、血管内皮生长因子(VEGF)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及转化生长因子-β1(TGF-β1)在创伤肢体骨膜及其周围的阳性表达差异。实验结果:(1)肢体软组织开放性损伤复合海水浸泡伤后骨膜炎症反应明显重于单纯致伤组,浸泡时间越长,骨膜炎症反应越重。(2)伤后1、3、7天,B组生发层细胞层数明显增加,与A组及C组对比相差非常显著(P<0.01);A组骨膜生发层细胞层数虽较C组增多,但两者相比无显著性差异(P>0.05)。(3)经海水浸泡1h后,膜内成骨明显延缓,而浸泡30min后,膜内成骨延缓不明显。(4)C组BMPs及VEGF三组骨膜骨原细胞及成骨细胞中表达时间明显延迟且明显弱于B组和A组,B组BMPs及VEGF表达时间虽未延迟但弱于A组。(5)TNF-α在三组骨膜骨原细胞及成骨细胞中均有表达,且于术后第1天达高峰,此后逐渐下降,其表达的量及时间随海水浸泡时间延长而增加。(6)TGF-β1在三组骨膜骨原细胞及成骨细胞中均有表达,并且在所观察的0至7天内均持续表达,其中B组表达明显强于C组及A组。实验结论:肢体软组织开放性损伤合并海水浸泡30min后,膜内成骨延缓不明显,骨膜骨原细胞及成骨细胞增生分化未受到明显影响;合并海水浸泡1h后,膜内成骨明显延缓,骨膜骨原细胞及成骨细胞增生分化明显延迟。海水浸泡加重骨膜损伤,海水浸泡1h后,可明显延迟并损害骨膜膜内成骨能力,提示骨膜对海水浸泡伤的最长耐受时间可能小于1小时。