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本试验参照Genebank上已发表的鸡α、β干扰素基因序列(序列号分别为:DQ226092、AY974089)设计三对引物,应用PCR技术分别从鸡肝脏DNA中扩增鸡α干扰素全基因、去掉信号肽的成熟蛋白基因以及鸡β干扰素去掉信号肽的成熟蛋白基因。将扩增得到的特异性片断分别克隆入pMD19-T载体中,转化感受态细胞DH5α中,提取质粒鉴定并进行序列测定。测序结果表明,鸡α干扰素全基因长为582bp,去掉信号肽的成熟蛋白基因长为489bp,与参考序列同源性分别为98.5%和98.2%。鸡α干扰素全基因与不同亚型参考基因序列同源性在97.9%以上,与IFNA1亚型同源性高达99.3%。鸡β干扰素去掉信号肽的成熟蛋白基因长为531bp,与参考序列同源性为100%。将克隆的鸡α、β干扰素去掉信号肽的成熟蛋白基因分别正向亚克隆到表达载体pGEX-2T的相应位点,构建了鸡α、β干扰素原核重组表达载体pGEX-ChIFNα’和pGEX-ChIFNβ’。之后,转化感受态细胞BL21,经质粒鉴定及序列测定表明,鸡α、β干扰素的成熟肽蛋白基因均正确的插入了原核表达载体pGEX-2T中。将含有重组表达质粒pGEX-ChIFNα’和pGEX-ChIFNβ’的阳性菌株,用1mM的IPTG诱导表达,表达产物经SDS-PAGE电泳后,均在约44KD处出现明显的蛋白质表达条带,表明重组表达载体pGEX-ChIFNα’和pGEX-ChIFNβ’成功表达了GST-ChIFNα’和GST-ChIFNβ’融合蛋白。