大黄鱼弧菌病免疫预防研究

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本文研究了从患病大黄鱼体内分离66株哈维氏弧菌(Vibrio.harveyi)的血清学性状,并选取了其中的强毒菌株制备成福尔马林灭活的V.harveyi菌苗(F-VH),对象山港网箱养殖大黄鱼进行了浸泡免疫试验,探讨了V.harveyi的浸泡免疫保护效果,得到了如下研究结果。 1.V.harveyi的血清型 从大黄鱼体内分离的66株V.harveyi中随机选取12个菌株,培养后制备成F-VH,分别接种家兔制备成抗血清,采用凝集法和琼脂内扩散法检测各个菌株的抗原特性。结果表明本研究的66株中的54株表现为四种不同的血清型(LY1、LY2、LY3、LY4),而另外12株V.harveyi采用上述两种方法无法对其进行血清学分型。同时,还发现V.harveyi的大多抗原是热不稳定抗原,加热容易导致抗原性降低。 2.V.harveyi疫苗浸泡免疫的效果 以F-VH对40日龄、75日龄、100日龄的大黄鱼幼鱼进行不同菌体浓度(10~8 cells/mL、10~7 cells/mL、10~6 cells/mL)、不同时间(1min、10min、60min)浸泡免疫,处理后饲养在野外网箱中。测定浸泡免疫后24周内各组试验鱼的免疫保护率(RSP),结果证明免疫处理后8~11周,试验鱼RSP达到95%~100%,以后稍有下降,到16~24周时,仍有70%~80%。野外统计结果表明,与对照组相比,免疫组大黄鱼幼鱼疾病发生少,发病期推迟,病程缩短,成活率提高(80%~95%),明显高于对照组。对不同日龄的幼鱼进行浸浴免疫,结果证实,40日龄的幼鱼也能获得保护性免疫;第一次免疫54天后以同样方式加强免疫,试验鱼在16周内保持了很高的RSP水平,明显高于同期一次免疫组;在试验浓度范围内,各浓度处理组的免疫保护率无明显的差异。本项研究的结果表明,采用V.harveyi菌苗对大黄鱼幼鱼进行浸泡免疫对于有效地抵抗目标病原疾病的侵袭,提高大黄鱼幼鱼的成活率是可行的。
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