论文部分内容阅读
三苯甲烷类染料废水是典型的化工业废水,废水的具有色度鲜艳、高盐度等特点,比如典型三苯甲烷类染料-孔雀石绿染料,它有时还会用作鱼类水体的除菌剂。后来研究发现该染料具有明显“三致”作用。故而人们开始重视对这类废水排出而引起的环境问题。越来越多的学者开始利用微生物降解染料废水。生活在高盐环境中微生物,具有其独特的生理代谢方式,正好可以适应高盐染料废水的环境。本文先从舟山双峰盐场的盐田中分离筛选出嗜盐或耐盐菌株,然后从中选取一株对孔雀石绿具有良好脱色能力的耐盐菌进行生理生化特性、脱色条件等进行研究。最后通过全基因组测序分析,从遗传学角度初步了解该菌基因组的基本信息。主要研究内容和结果如下:（1）采用传统的涂布分离及划线纯化方法在高盐ATCC213固体培养基上分离纯化出八株嗜（耐）盐菌。并根据菌株的16s rDNA测序分析,八株嗜（耐）盐菌主要为葡萄球菌属（Staphylococcus）、芽孢杆菌属（Bacillus）、盐单胞菌属（Halomonas）、喜盐芽孢杆菌属（Halobacillus）、盐弧菌属（Salinivibrio）海芽孢杆菌属（Pontibacillus）六大类。（2）通过孔雀石绿脱色实验发现,A4菌株具有优异的脱色性能,经形态观察和16s DNA序列的系统发育学分析,鉴定为Staphylococcus saprophyticus JJ-1。对菌株JJ-1的盐浓度生长测定表明:S.saprophyticus JJ-1在氯化钠浓度为0150g/L均可生长,最适氯化钠浓度为0 g/L。故S.saprophyticus JJ-1为典型的极端耐盐菌。（3）研究孔雀石绿的浓度、pH、氯化钠浓度及氧气对染料脱色的影响,并对脱色产物进行紫外-可见吸收光谱分析,HPLC分析和GC-MS分析,以揭示孔雀石绿的降解产物。脱色反应条件初步研究表明,S.saprophyticus JJ-1在4 h内对200 mg/L孔雀石绿脱色率可高达95%;该菌在低浓度孔雀石绿（<50mg/L）时能够在1 h内快速脱色;在有氧和厌氧条件下该菌的脱色率基本保持一致;在15%NaCl,200 mg/L孔雀石绿条件下,5 h后的脱色率为94%;接菌量OD600值为0.5时,2 h内足够将200 mg/L孔雀石绿脱色完全;该菌脱色的适宜pH 7-8,培养时间4h,脱色率达到95%。孔雀石绿的主要降解产物为4-（二甲氨基）二苯甲酮。（4）全基因组测序表明,S.saprophyticus JJ-1的基因组由4个contig组成,大小为2,638,586 bp,GC含量为32.31%,预测编码基因为2546个,基因组学分析发现1个CRISPR系统和3个基因岛。