目的:构建致农民肺嗜热吸水链霉菌cDNA文库并进行EST测序，通过生物信息学软件分析EST序列同源性及生物学功能，筛选重组阳性基因克隆进行体外克隆并诱导表达。　　方法:利用SMART方法构建致农民肺嗜热吸水链霉菌的cDNA文库，将平板内克隆进行编号，取前1020个克隆提取质粒，进行EST测序。分析EST测序结果并预测基因功能，从中筛选有关目的基因，将这些目的基因亚克隆入pET-28a载体，将重组子转化大肠杆菌BL2(DE3)，用IPTG诱导相关蛋白的体外表达。　　结果:成功构建了较高质量的嗜热吸水链霉菌cDNA文库，得到有义序列978个，获得单一基因347个，其中2段基因分别与胸膜肺炎放线菌外膜蛋白(omlA)，转铁蛋白B(TbpB)的同源性为51％和42％，其开放阅读框(ORF)长度分别为1554bp和726bp，分别编码571和241个氨基酸，将2段基因亚克隆入原核表达载体中，IPTG诱导表达产物的相对分子质量分别为63kDa和30kDa。　　结论:所构建的致农民肺嗜热吸水链霉菌cDNA文库包含全部EST序列，可能包含嗜热吸水链霉菌相关疾病巨大部分毒力分子，这些数据的积累将有助于农民肺特异性毒力分子的进一步筛选，同时为研究农民肺的发病机制奠定基础，如果能准确筛选出相关毒力基因，将为农民肺血清学诊断以及特异性疫苗的研发奠定基础。