目的:本试验先从16种中药单体化合物中体外筛选具有抗脑心肌炎病毒（Encephalomyocarditis virus,EMCV）的化合物,并以IFN-β为研究点,探讨候选化合物（莪术醇）的抗EMCV作用机制,丰富抗病毒中药单体化合物库,为临床研制抗EMCV药物提供理论基础。方法:利用噻唑蓝比色法（MTT）分别测得16种中药单体化合物在BHK-21细胞的最大安全浓度（Maximam non-toxic concentration,MNTC）和半数安全浓度(50%cytotoxic concentration,CC50)。然后利用MTT法分别检测供试中药单体化合物对EMCV感染BHK-21细胞的最大抑制率（Maximum inhibition ratio,MIR）和半数有效浓度(50%effective concentration,EC50),筛选出MIR﹥50%和选择指数（Selection index,SI）﹥3的中药单体化合物。利用实时荧光定量PCR（q PCR）方法检测已选中药单体化合物对EMCV载量的影响,评价其抗病毒效果。筛选出抗病毒效果最好的中药单体化合物（莪术醇）,在HEK-293T细胞上再次利用上述方法对其抗EMCV活性进行验证。利用q PCR和ELISA法确定莪术醇对EMCV感染HEK-293T细胞IFN-β基因和蛋白的表达量的影响;Western blot法检测莪术醇对EMCV感染HEK-293T细胞MDA5、MAVS、TANK、IRF3、p-IRF3蛋白表达的影响。结果:1.通过公式计算各中药单体化合物在BHK-21细胞上的病变率,确定供试中药单体化合物的MNTC和CC50。除栀子苷和甘草酸,其他中药单体化合物均呈现了“S”型剂量依赖关系,即随着中药单体化合物浓度的增加,BHK-21细胞病变程度越严重,呈现不同程度的细胞皱缩、裂解等病变。供试中药单体化合物的CC50在27.8至4000μg/m L之间,其MNTC值在12.5至4000μg/m L之间。表明了不同中药单体化合物对BHK-21细胞的毒性不同。2.在BHK-21细胞上,与阳性药物利巴韦林相比,莪术醇（87%）、苦参碱（80%）和黄芩苷（78%）的MIR值大于利巴韦林（76%）。q PCR结果显示,莪术醇、苦参碱和黄芩苷能够显著降低EMCV病毒载量（p﹤0.05）。3.莪术醇在HEK-293T细胞上MNTC和CC50值分别为25和124μg/m L。其MIR为89%,高于利巴韦林（80%）。q PCR结果显示,莪术醇能够显著抑制EMCV在HEK-293T细胞上的复制（p﹤0.05）。表明莪术醇能够抑制EMCV在HEK-293T和BHK-21细胞的感染。4.qPCR和ELISA结果表明莪术醇能够显著升高EMCV感染HEK-293T细胞IFN-β基因和蛋白的表达量（p﹤0.05）。Western blot结果表明莪术醇能够促进MDA5的表达,抑制EMCV介导的TANK蛋白的降解,促进p-IRF3的表达,而MAVS、IRF3表达量保持不变。结论:1.莪术醇、苦参碱和黄芩苷具有体外抗EMCV感染BHK-21细胞的作用,其中莪术醇效果最好。2.莪术醇能够缓解EMCV对TANK蛋白的降解,提升p-IRF3的表达,从而显著增加IFN-β的表达,发挥其抗病毒作用。