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本文以人乳腺癌细胞MCF-7为研究对象,在小瓶培养的基础上,对MCF-7进行规模放大培养,建立了MCF-7的滚瓶培养方法,然后研究了软骨多糖对MCF-7的诱导凋亡作用及其作用机理。本研究首先以滚瓶转速为变量,通过单因素试验确定了MCF-7滚瓶培养的滚瓶初期转速范围和贴壁后转速范围。然后以接种量、培养液添加量和培养时间为自变量,进行了三因素三水平的正交试验,通过分析得出对细胞产量影响极显著的因素为接种量和培养时间,根据正交试验的结果确定了滚瓶培养MCF-7的最佳方案为初期转速15r/h,贴壁后转速40r/h,接种量为5×107个细胞,培养时间96h,培养基用量150mL。在确立了MCF-7的滚瓶培养方法后,研究了软骨多糖对滚瓶培养MCF-7细胞的凋亡作用。Hochest33342/PI双染色、Annexin V-FITC/PI 和 DNA Ladder等实验结果都表明MCF-7细胞在软骨多糖作用后出现典型的凋亡现象。通过流式细胞仪检测发现在软骨多糖作用12h,24h的MCF-7凋亡率分别为20.23%和44.7%；同时发现MCF-7细胞在软骨多糖作用后,细胞周期被阻滞在了S期。通过二维电泳技术分析了正常MCF-7细胞和与软骨多糖共培养MCF-7细胞的全蛋白图谱,发现10个具有表达差异的蛋白点,其中7个蛋白点的表达量下调,3个蛋白点表达量上调。选取其中表达差异最显著的3个蛋白点,通过MALDI-TOF-MS/MS进行鉴定,共鉴定出2个差异表达蛋白,其中一个为肌动蛋白actin,其表达下调诱导线粒体凋亡途径,另一个为抗氧化类蛋白PRDX6,其表达降低,导致细胞发生氧化损伤凋亡。