目的：　　 MicroRNAs(miRNAs)是生物体内源长度约为21-25个核苷酸的非编码小RNA，由茎环结构的转录前体加工而成。miRNA与靶标基因3UTR结合，通过降解mRNA或抑制其翻译，从而在转录后对靶标基因的表达水平进行调控。到目前为止，已报道有几千种miRNA存在于动物、植物、真菌等多细胞真核生物中，进化上高度保守。进一步研究证实，miRNA在细胞的增殖、凋亡、分化、代谢，以及个体发育方面都发挥着重要的作用，并且在肿瘤的发生与发展中发挥着重要的作用。　　 卵巢恶性肿瘤在女性生殖器肿瘤中的发生率占第3位，但其死亡率却占据第一位。卵巢深居盆腔之中，一旦发生恶性肿瘤，症状十分隐蔽，当患者发生不适就诊时，绝大多数已经进入晚期。虽然近几十年来，已经成功探索出在肿瘤细胞减灭术基础上辅助化疗的治疗策略，但晚期卵巢癌的5年生存率仍然很低，尤其是对于常见的卵巢上皮性癌，只能改善2-3年的近期存活率。上皮性卵巢癌约占卵巢癌90％左右，上皮性卵巢癌在组织学上分为浆液性，黏液性，子宫内膜样，透明细胞，布伦纳和未分化癌，是妇科恶性肿瘤导致性死亡的主要原因。而长期以来卵巢癌患者的5年存活率始终停留在30％左右，主要是卵巢上皮性癌手术及化疗后的复发率很高，而且复发病灶多局限在腹腔内脏器的表面，故早期无症状。　　 在本研究中，我们参考国内外相关文献及前期关于卵巢癌的miRNA表达谱的研究，初步确定miR-148a和miR-152为我们的研究重点。利用定量real-time PCR技术检测了卵巢癌组织相对于正常卵巢组织中miR-148a和miR-152的表达水平。通过使卵巢癌细胞系中过表达miR-148a和miR-152，初步探索其在卵巢癌的发生、发展中的作用。　　 方法：　　 一、MiR-148a在卵巢癌组织中的表达　　 收集77例卵巢癌患者肿瘤标本及17例正常卵巢组织手术标本，经提取RNA，加尾，抽提纯化，反转录后得到cDNA模板，运用定量real-time PCR检测卵巢癌组织中miR-148a相对于正常卵巢组织的表达量。如果相对表达量小于1，则被认为是低表达；反之，被认为是高表达。然后运用统计学方法分析miR-148a表达量与临床病理资料之间的相关性。　　 二、MiR-152在卵巢癌组织中的表达　　 收集77例卵巢癌患者肿瘤标本及17例正常卵巢组织手术标本，经提取RNA，加尾，抽提纯化，反转录后得到cDNA模板，运用定量real-time PCR检测miR-152相对于正常卵巢组织的表达量。如果相对表达量小于1，则被认为是低表达。反之，被认为是高表达。然后运用统计学方法分析miR-152与临床病理资料之间的相关性。运用统计学方法分析miR-148a和miR-152二者在卵巢癌组织中表达的相关性。　　 三、MiR-152在卵巢癌细胞系中的表达及其对细胞增殖及侵袭能力的影响　　 由于没有正常的卵巢细胞系，我们以17例正常卵巢组织作为卵巢癌细胞系的阴性对照。运用定量real-time PCR检测出miR-152在卵巢癌细胞系(SKOV3)中的表达情况。向卵巢癌细胞系中(SKOV3)转染miR-152 mimics，使miR-152在卵巢癌细胞系过表达，通过MTT实验检测转染miR-152 mimics后对细胞增殖及Transwell检验转染miR-152 mimics后对侵袭能力的影响。　　 四、MiR-148a在卵巢癌细胞系中的表达及其对细胞增殖及侵袭能力的影响　　 由于没有正常的卵巢细胞系，我们以17例正常卵巢组织作为卵巢癌细胞系的阴性对照。运用定量real-time PCR检测出miR-148a在卵巢癌细胞系(SKOV3)中的表达情况。向卵巢癌细胞系中(SKOV3)转染miR-148a mimics，使miR-148a在卵巢癌细胞系过表达，通过MTT实验检测转染miR-148a mimics后对细胞增殖及Transwell检验转染miR-148a mimics后对侵袭能力的影响。　　 结果：　　 一、MiR-148a在卵巢癌组织中的表达　　 在人卵巢癌组织中发现77例卵巢癌组织中，50(64.9%)例miR-148a低表达，但miR-148a较正常卵巢组织表达无明显差异(p>0.05)。MiR-148a的表达与临床病理资料，化疗疗效无明显相关。　　 二、MiR-152在卵巢癌组织中的表达　　 1、在人卵巢癌组织中发现m1R-152较正常卵巢组织呈低表达。在77例卵巢癌组织中52(67.5%)例miR-152(p<0.05)低表达。MiR-152的表达与临床病理资料，化疗疗效无明显相关。　　 2、MiR-148a及miR-152二种miRNAs的表达在卵巢癌组织中存在显著的相关性(p<0.001)。　　 三、MiR-152在卵巢癌细胞系中的表达及其对细胞增殖及侵袭能力的影响　　 定量real-time PCR结果显示，miR-152在人卵巢癌细胞系SKOV3(p<0.001)中呈低表达。SKOV3在转染了miR-152 mimics后，经定量real-time PCR检测验证，转染了miR-152 mimics的实验组细胞系中，miR-152的表达水平相对于对照组有不同水平的提高。应用MTT法绘制的生长曲线表明，对于SKOV3细胞系，转染了miR-152 mimics实验组的细胞在48小时开始其增殖速率明显低于阴性对照及空白对照组(p<0.05)但Transwell实验显示对侵袭能力无明显抑制(p>0.05)。　　 四、MiR-148a在卵巢癌细胞系中的表达及其对细胞增殖及侵袭能力的影响　　 定量real-time PCR结果显示，miR-148a在人卵巢癌细胞系SKOV3(p<0.001)中呈低表达。SKOV3在转染了miR-148a mimics后，经定量real-time PCR检测验证，转染了miR-148a mimics的实验组细胞系中，miR-148a的表达水平相对于对照组有不同水平的提高。应用MTT法绘制的生长曲线表明，对于SKOV3细胞系，转染了miR-148a mimics实验组的细胞在48小时开始其增殖速率明显低于阴性对照及空白对照组(p<0.05)但Transwell实验显示对侵袭能力无明显抑制(p>0.05)。　　 结论：　　 1、卵巢癌组织中miR-148a的表达量与正常卵巢组织无明显差异。MiR-148a的表达与临床病理资料及化疗疗效无明显相关。　　 2、卵巢癌组织中miR-152的表达量显著低于正常卵巢对照组，其表达水平与临床病理资料及化疗疗效无明显相关。　　 3、MiR-148a及miR-152二种miRNAs在卵巢癌组织中的表达存在显著的相关性。　　 4、卵巢癌细胞系SKOV3中，miR-148a的表达量显著低于正常卵巢组织对照组。　　 5、MiR-148a的过表达抑制了卵巢癌细胞的增殖，但对卵巢癌细胞的侵袭能力无明显抑制。　　 6、卵巢癌细胞系SKOV3中，miR-152的表达量显著低于正常卵巢组织对照组。　　 7、MiR-152的过表达抑制了卵巢癌细胞的增殖，但对卵巢癌的侵袭能力无明显抑制。