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目的评价膳食亚麻籽油(FO)和亚麻木酚素(SDG)对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠的干预效果,初步揭示可能的作用机制。方法将6周龄雌性SD大鼠随机分为6组(8只/组):阴性对照组(PF/CON)、模型组(PF/MOD)、亚麻籽油对照组(FO/CON)、亚麻籽油干预模型组(FO/MOD)、亚麻木酚素对照组(SDG/CON)、亚麻木酚素干预模型组(SDG/MOD)。采用来曲唑造模法建立PCOS大鼠模型,根据阴道分泌物涂片中细胞种类、数量的变化及病理检查判断造模是否成功。造模成功后,各组分别灌胃生理盐水(PF/CON组和PF/MOD组)、FO溶液(FO/CON组和FO/MOD组)、SDG溶液(SDG/CON组和SDG/MOD组)8周,期间监测大鼠体重(每周)和动情周期变化(每日)。干预结束后收集大鼠粪便和阴道分泌物,随后处死大鼠,收集血浆(清)及卵巢组织样本检测相应指标。(1)卵巢组织石蜡包埋切片后采用苏木素-伊红(HE)染色法评估大鼠卵巢病理损伤情况。(2)采用酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒检测大鼠血浆性激素指标:睾酮(T)、雌二醇(E2)、黄体生成素(LH)、孕酮(PROG)和性激素结合球蛋白(SHBG)的水平。(3)采用葡萄糖氧化酶法检测空腹血糖(FPG),ELISA法检测空腹胰岛素(FINS)的变化。(4)采用酶法检测大鼠血浆总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平。(5)采用酶法检测血清氧化应激指标:丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)和总超氧化物歧化酶(T-SOD)的活性。(6)采用ELISA法检测血浆和卵巢匀浆炎症因子:白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-10、IL-17A、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)的浓度;采用鲎试剂显色基质法检测血浆脂多糖(LPS)的水平。(7)利用流式细胞术检测大鼠外周血、脾脏和骨髓中髓源抑制细胞(MDSCs)以及卵巢组织中巨噬细胞(Mψs)比例的变化。(8)通过16S r DNA高通量测序分析大鼠肠道菌群和生殖道菌群多样性及丰度的变化。(9)利用气相色谱-质谱(GC-MS)法检测大鼠粪便中短链脂肪酸(SCFAs)水平。(10)最后,通过相关性分析评估肠道/生殖道菌群与炎症因子、性激素以及菌群代谢物的相关性。结果(1)动情周期、卵巢大体和卵巢组织HE染色结果表明:来曲唑干预后动情周期紊乱、卵巢组织囊性卵泡增加、黄体减少或消失,提示PCOS大鼠造模成功;FO和SDG干预后显著改善了动情周期紊乱,卵巢组织可见正常卵泡发育和黄体生成。(2)FO和SDG干预后缓解了性激素紊乱,体现在显著降低了大鼠血浆T和LH水平,提高了E2和PROG水平。(3)FO和SDG干预后降低了FINS水平、HOMA-IR指数和体重。(4)FO和SDG干预通过提高HDL-C水平,降低TC、TC和LDL-C水平,改善了血脂异常。(5)FO和SDG干预增加了大鼠血清抗氧化酶GSH-PX和T-SOD水平,减少了MDA水平,进而减轻氧化应激损伤。(6)FO和SDG干预抑制了血浆和卵巢的促炎因子(IL-1β、IL-6、TNF-α和MCP-1)水平,提高抗炎因子IL-10浓度,此外还降低了血浆LPS水平。(7)FO和SDG干预后外周血、脾脏、骨髓的MDSCs细胞比例显著增加,卵巢Mψs比例显著降低。(8)肠道菌群测序结果显示,FO干预后显著降低Firmicutes/Bacteroidetes、Actinobacteria和Bacteroides的相对丰度比例;提高Lactobacillus、Allobaculum、Desulfovibrio、Butyrivibrio和Bifidobacterium的丰度。SDG干预后明显降低Firmicutes/Bacteroidetes、Bacteroides和Parasutterella的相对丰度比例;提高Lactobacillus、Allobaculum、Butyrivibrio、Ruminiclostridium和Bifidobacterium的丰度。(9)生殖道菌群测序结果显示,FO干预后明显降低Proteobacteria和Streptococcus的相对丰度;提高Bacteroidetes、Faecalibacterium、Lactobacillus和Parabacteroides的相对丰度。SDG干预后明显降低Proteobacteria的相对丰度;提高Bacteroidetes、Faecalibacterium和Lactobacillus的相对丰度。(10)FO和SDG干预后SCFAs乙酸、丙酸、丁酸和戊酸的含量显著增加。(11)相关性分析结果显示,Lactobacillus、Butyrivibrio、Desulfovibrio和Bifidobacterium的丰度与SCFAs、E、PROG、IL-10等呈正相关,与LPS、T、LH和促炎因子呈负相关。Actinobacteria、Bacteroides、Proteobacteria和Streptococcus的丰度与SCFAs、E、PROG、IL-10等呈负相关,与LPS、T、LH和促炎因子呈正相关。结论膳食FO和SDG可通过减轻炎症、调节性激素和肠道/生殖道菌群改善PCOS大鼠。