烟草根系中NtWRKY-R15’UTR和NtNAC-R1功能研究

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根系是主要的烟碱合成部位。研究发现,在烟株打顶后,烟草根系合成烟碱的能力增强。但调节机制并不清楚。为了研究烟株打顶诱导根系烟碱生物合成信号传导的分子机制,我们从烟株打顶前后根尖组织的SSH-cDNA文库中筛选并克隆得到的NtNAC-R1、NtWRKY-R1,以此为研究对象,探讨这两个转录因子基因对烟株打顶后诱导根系烟碱合成能力过程中的作用。主要实验结果如下:  1.构建了NtNAC-R1的干扰表达载体(RNAi)pFGC5941-NtNAC-R1,转化烟草K326,得到了F1代烟株。以移栽后30d的K326烟草品种为材料,以野生型为对照,以前期获得的NtNAC-R1过表达转化烟株和上述NtNAC-R1RNAi转化烟株的F1代进行qPCR检测PMT、NtWRKY-R1、NtNAC-R1表达变化。结果显示,NtNAC-R1过表达烟株中的PMT表达水平是对照的1.65倍,而NtNAC-R1RNAi烟株中的PMT表达水平是对照的0.27倍,表明NtNAC-R1参与了打顶伤害诱导烟碱合成的过程;而NtNAC-R1过表达烟株中的NtWRKY-R1表达水平是对照的0.25倍,而NtNAC-R1RNAi烟株中的NtWRKY-R1表达水平是对照的0.17倍,表明NtNAC-R1对NtWRKY-R1表达没有显著影响。  2.构建了NtWRKY-R1的5’UTR缺失载体,通过瞬时表达分析,结果显示NtWRKY-R1的5’UTR对NtWRKY-R1的表达具有调控作用。  其结果为进一步研究其在烟株打顶伤害对根系烟碱生物合成调节过程中的作用奠定基础。
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