秋水仙碱诱导三个猕猴桃品种多倍体产生及非生物胁迫初探

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猕猴桃是多年生藤本植物,因其独特的风味和肉色以及高维生素C、矿物质和膳食纤维含量而广受消费者青睐。目前全世界猕猴桃属植物约有54个种,猕猴桃雌雄异株,且雄株不能结果,杂交育种效率较低,目前产业上的大多数中华二倍体品种果个小,且抗性较弱,而染色体加倍被证明在果树上可以产生更加优良的性状。为了丰富猕猴桃种质资源,本试验选取‘杨氏金红50号’、‘金猕’、红阳后代优选株‘ZPS-18’三个中华猕猴桃二倍体品种株系,首先进行了外植体的培养,获得愈伤组织后,设计三种不同激素配比的MS培养基,筛选出最适合这三种中华猕猴桃组培苗生长的培养基配方,再用秋水仙碱对这三个品种的愈伤组织进行加倍处理,诱导成单独株系,利用形态观察法初步筛选多倍体植株,再用流式细胞仪鉴定倍性,获得同源四倍体植株并进行驯化移栽。同时,分析了‘杨氏金红50号’二倍体及其同源四倍体在盐胁迫、干旱胁迫、低温胁迫下组培苗叶片和茎中过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和丙二醛(MDA)含量变化,对同源四倍体猕猴桃及其二倍体祖先的抗逆机理进行了初步探索,以期通过染色体加倍培育出优质、高产、抗逆的猕猴桃新品种,从而丰富猕猴桃的种质资源。主要研究结果如下:1.以二倍体的‘杨氏金红50号’、‘金猕’和红阳后代优选株‘ZPS-18’叶片为外植体,建立了快繁体系。最佳外植体灭菌方法:75%乙醇30s,0.1%的氯化汞灭菌4min,无菌水冲洗4遍;诱导愈伤组织的培养基为MS+ZT 1.0mg/L+2,4-D 1.0mg/L;不定芽最适增殖培养基为MS+6-BA 3.0mg/L+ZT 2.0mg/L+IBA 0.1mg/L;最适生根培养基为1/2MS+IBA 1mg/L,生根率为85%,移栽成活率90%。2.利用秋水仙碱溶液浸泡二倍体愈伤分生组织进行同源四倍体诱导。结果显示:0.1%秋水仙碱浸泡4h诱导效率最佳,‘杨氏金红50号’诱导率为37%;‘金猕’诱导率为24%;‘ZPS-18’诱导率为3%。3.对‘杨氏金红50号’四倍体和二倍体的抗盐性、抗旱性和抗寒性进行了初步比较分析,测定了非生物胁迫下叶片和茎中SOD、POD、CAT活性和MDA含量的变化情况。结果显示,逆境胁迫下四倍体的活性氧活性整体高于二倍体;细胞膜的损伤程度却低于二倍体。初步分析认为四倍体在对抗非生物胁迫方面要强于二倍体。
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