论文部分内容阅读
目的：房颤(atrial fibrillation, AF)会造成心房电重构(atrial electrical remodeling, AER), AER所导致的动作电位时程(APD)、有效不应期(ERP)缩短,不应期离散度增加,心房不应性对心律改变的适应性改变,使AF得以维持。现已明确,细胞内Ca2+超载是AF时诱发心房电重构的主要因素。许多学者通过动物实验及临床研究证实快速性心房起搏(RAP)可诱发类同于AF的心房电重构。快速起搏实验动物模型心房肌细胞的研究已发现钠通道电流(INa)密度及基因和通道蛋白表达下降,而在人类AF患者,多数学者认为RAP对INa密度及表达无明显影响。近年的动物实验及临床研究也表明,肾素-血管紧张素系统(RAS)的激活与AF的发生、发展以及复发密切相关；此外,血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)可通过激活钙通道电流及磷脂酰肌醇途径导致细胞内钙超载,因此在AER过程中起关键作用,抑制AngⅡ可延缓AER的发生及进展。关于RAS抑制剂对AF预防作用的研究也提示RAS可能是AF心房电重构的重要媒介。血管紧张素-(1-7)[Ang-(1-7)]是RAS系统的一个具有生物活性的独立成员,具有与AngⅡ相拮抗的作用。我们的前期实验研究阐明了血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)依那普利、血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂(ARB)厄贝沙坦及Ang-(1-7)对快速心房起搏犬心房肌L型钙通道电流(ICa-L)、瞬时外向钾电流(ITO)及其基因表达的影响,但这三种干预因素对INa。及其基因表达的影响尚不明确。故本研究建立犬快速心房起搏房颤模型以观察ACEI、ARB及Ang-(1-7)对INa及其基因表达的影响。方法：普通杂种犬30只随机分为5组,假手术组(Sham组),心房起搏组(Control组),心房起搏+依那普利组(Enalapril组),心房起搏+厄贝沙坦组(Irbesartan组),心房起搏+Ang-(1-7)组[Ang-(1-7)组],每组6只。特制心房起搏器(AOO)埋于肩胛后囊袋,起搏电极经右颈外静脉固定于右心房。在心房起搏组、起搏+依那普利组、起搏+厄贝沙坦组及起搏+Ang-(1-7)组,给予500bpm维持起搏2周。假手术组安置起搏器但不行起搏刺激。实验过程中起搏+依那普利组、Irbesartan组及Ang-(1-7)组犬分别接受口服依那普利2mg·kg-1·d-1,厄贝沙坦60mg·kg-1·d-1或经颈静脉途径Ang-(1-7)6μg·Kg-1·h-1。起搏过程结束后,分离左房肌细胞行全细胞电流INa记录,观察各组犬INa电流密度的差异。以右房肌组织行RT-PCR研究,观察钠通道蛋白Nav1.5α亚单位基因表达情况。结果：心房起搏组INa。最大电流密度为-32.65±10.92pA/pF (n=28),较假手术组(-61.56±14.17 pA/pF, n=14)减少46.96%,P<0.05；与心房起搏组相比,INa最大电流密度在起搏+依那普利组为-44.11±16.76pA/pF (n=11)、起搏+厄贝沙坦组为-65.24±14.79pA/pF(n=13)和起搏+Ang-(1-7)组为-66.56±18.08pA/pF(n=11),较心房起搏组分别增加35.10%, 99.82%和103.86%(P<0.05)。假手术组INa半激活电位(V1/2act)为-50.68±4.45mV (n=14),心房起搏组为-49.43±4.44mV (n=28),两组之间无显著差异(P>0.05)；INa半激活电位在起搏+依那普利组、起搏+厄贝沙坦组和起搏+Ang-(1-7)组分别为-54.46±5.43mV (n=11),-55±5.35mV(n=13),-57.40±3.28mV (n=11),与假手术组和心房起搏组相比,更趋向于超极化,具有显著性差异(P<0.05)。四个干预组IN。激活曲线的斜率因子Kact分别为心房起搏组1.77±1.31,起搏+依那普利组0.95±1.14,起搏+厄贝沙坦组0.85±1.09,起搏+Ang-(1-7)组0.57±0.75,与假手术组(0.75±0.99)相比,均无显著性差异。各干预组IN。半失活电压(V1/2inact)和失活曲线斜率因子(κinact)分别为心房起搏组-89.16±5.40 mV和4.57±0.48,起搏+依那普利组-92.40±2.59mV和4.78±0.35,起搏+厄贝沙坦组-88.31±9.12mV和4.61±0.76,起搏+Ang-(1-7)组-90.92±3.00 mV和4.65±0.55,与假手术组(-84.89±4.05mV和4.16±0.81)相比均无显著性差异。与假手术组相比,心房起搏组Nav1.5α亚单位mRNA表达明显降低(P<0.05)；与心房起搏组相比,依那普利、厄贝沙坦可逆转快速心房起搏所致的Nav1.5α亚单位mRNA的表达水平的降低(P<0.05),Ang-(1-7)对其则无明显影响(P>0.05 vs心房起搏组)。结论：快速心房起搏可以通过降低犬心房肌Nav1.5α亚单位mRNA表达而降低INa电流幅度；依那普利、厄贝沙坦可通过超极化INa半激活电位和逆转Nav1.5α亚单位mRNA表达的降低而使INa电流幅度升高；Ang-(1-7)对Nav1.5 a亚单位基因表达无明显影响,可能通过过超极化INa半激活电位升高INa电流幅度；INa电流幅度的升高有助于提高心房肌传导速度,从而抑制电重构。