海水网箱养殖场沉积物中好氧反硝化细菌的筛选鉴定及模拟应用

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海水网箱养殖是一种高密度、高投饵的人工养殖方式,其输出的残饵、代谢及排泄废物等造成海水高营养盐负荷,导致海水富营养化,成为赤潮发生的诱因。大部分富营养化的海水中氮、磷含量十分丰富,尤其以无机氮污染最为严重。海水网箱养殖环境中无机氮的污染,严重影响了海水养殖的经济效益及制约其发展。作为生物脱氮新技术之一的细菌好氧反硝化与传统的细菌厌氧反硝化相比更具有独特优势,适合治理大面积氮污染水域。本研究从深圳市大鹏澳海水网箱养殖场沉积环境中筛选出能将无机氮去除的好氧反硝化细菌,以期为进一步探索网箱养殖环境无机氮生物原位修复技术研究提供参考依据。主要研究结果如下:1.本研究通过定量投加硝酸盐和控制曝气来驯化海水网箱养殖场的沉积物,以提高其在好氧条件下对硝酸盐的去除率达到富集好氧反硝化细菌的目的,富集纯化了10株好氧反硝化细菌N41-1、N41-2、N42-1、N42-2、N42-3、N51-1、N51-2、N51-5和N52-1。经反硝化初步筛选及反硝化性能测试,从10株富集纯化的好氧反硝化细菌中筛选出2株反硝化性能较好的好氧反硝化细菌N42-2和N52-1,能在3-10d内有效地降低亚硝酸盐和硝酸盐浓度,其对NO2--N和NO3--N的去除率分别为99.5%、98.1%和95.8%、100%。2.经部分长度16S rDNA序列分析,并通过GenBank数据库进行同源性检索,得出菌株N42-2和N52-1与多株盐单胞菌属(Halomonas sp.) 16S rDNA的相似性水平达99%以上,并结合细菌形态学特征及生理生化特性分析,基本确定所筛选出的2株好氧反硝化菌N42-2和N52-1均属盐单胞菌属(Halomonas sp.)。3.将菌株N42-2和N52-1投加到模拟海水网箱养殖场环境中,测定其对模拟环境无机氮的修复效果。综合比较2株菌对模拟海水网箱养殖场环境无机氮修复情况,菌株N42-2的能力优于N52-1。虽然这2株菌对NO3--N都具有反硝化能力,但N42-2的生物修复能力更强。N42-2在不同试验条件下对NO3--N都有一定反硝化能力,能不同程度的将NO3--N去除,去除率最高达94.6%,而N52-1只在20℃时对NO3--N有反硝化作用。4.综合比较了20℃和28℃条件下好氧反硝化菌反硝化效果,得出适合模拟海水网箱养殖场环境进行的无机氮生物修复试验的较佳温度为20℃。
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