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目的：构建HLA-A*1101重链胞外域羧基端融合生物素化酶BirA底物肽（BSP）的融合蛋白（HLA-A11-BSP）原核表达载体，在大肠杆菌中表达该融合蛋白，并进一步制备负载人巨细胞病毒（HCMV）pp65抗原肽的HLA-A*1101-GPI四聚体。方法：以RT-PCR法扩增并克隆HLA-A*1101重链基因的cDNA，以PCR方法构建HLA-A11-BSP的表达载体，在大肠杆菌BL21（DE3）中诱导表达。优化HLA-A*1101-BSP在大肠杆菌中的诱导表达的温度、时间和诱导剂IPTG浓度，并以抗HLA-A*0201抗血清进行免疫印迹鉴定HLA-A11-BSP的表达水平。将初步纯化的HLA-A*1101-BSP与β2-微球蛋白（β2m）和HCMV抗原肽pp6516-24（GPISGHVLK，简称GPI）一起利用稀释法进行重折叠复性，获得可溶性HLA-A*1101-GPI单体，经生物素化和纯化后，与Streptavidin-PE结合形成四聚体，以流式细胞仪分析四聚体的染色特性。结果：从HLA-A2阴性的供者外周血单个核细胞中克隆到HLA-A*1101重链基因的cDNA，以此cDNA为模板，将编码HLA-A*1101重链胞外域1—276序列与编码BSP的序列融合，构建HLA-A11-BSP融合蛋白表达载体，重组质粒经测序验证完全正确。融合蛋白在BL21（DE3）中诱导后获得高效表达，约占菌体总蛋白的20％；其相对分子质量约为35000，与理论值一致。免疫印迹分析显示表达产物存在于包涵体中，上清液中几乎无任何产物存在。重链分子在轻链β2m和抗原肽GPI存在下进行体外复性，获得可溶性HLA-A*1101-GPI单体，经生物素化并以阴离子交换柱层析分离，得到生物素化的纯化单体，后者与Streptavidin-PE按4：1比例混合后形成HLA-A*1101-GPI四聚体，多聚化程度达80％。流式细胞仪分析显示HLA-A*1101-GPI四聚体具有与特异性细胞毒T细胞（CTL）的结合活性。结论：成功构建表达HLA-A11-BSP融合蛋白的原核表达载体，该融合蛋白在大肠杆菌中以包涵体形式获得高水平表达，并进一步获得可溶性HLA-A*1101-GPI单体和四聚体，为研究HLA-A*1101限制性CTL的免疫应答打下基础。