谷氧还蛋白(Glutaredoxin，Grx)是细胞内一种重要的巯基—二硫键氧化还原酶，在细胞内氧化还原平衡状态的调控及抵抗氧化应激损伤过程中发挥重要作用。 本文通过观察HEK293T细胞中Grx1过表达对H2O2诱导的p38MAPK途径的影响来深入探讨Grx1的抗氧化机制。本实验利用RT-PCR技术从ECV304细胞中获得人Grx1的cDNA序列并定向克隆入真核表达载体pcDNA3.1(+)中，构建重组表达载体pcDNA3.1(+)-hGrx1。用脂质体介导的方法将pcDNA3.1(+)-hGrx1瞬时转染HEK293T细胞，经半定量RT-PCR和Westernblot方法检测转染重组质粒后HEK293T细胞中Grx1mRNA和蛋白的表达水平，实验结果显示，转染Grx1组细胞中Grx1mRNA和蛋白的表达水平均明显高于转染空质粒组，实现了Grx1在HEK293T细胞中的瞬时过表达。以不同浓度H2O2为损伤因素，建立细胞氧化应激模型，通过观察细胞形态，细胞存活率，LDH漏出率，MDA含量和SOD活力等指标的变化，验证转染Grx1后细胞的抗氧化应激能力。用终浓度100μmol/LH2O2作用于细胞，利用Westernblot方法检测120min内细胞中磷酸化p38MAPK含量的变化来观察p38MAPK信号传导通路的改变，实验结果表明，转染空质粒组细胞磷酸化p38MAPK含量在H2O2刺激后5min开始升高，15min达到最高值，以后逐渐下降，120min基本恢复正常；而Grx1过表达组细胞磷酸化p38MAPK含量在H2O2刺激后各时间段没有明显改变，说明Grx1过表达可以阻断H2O2诱导的p38MAPK信号传导通路的激活。 本实验为阐明Grx1的抗氧化机制提供新的证掘，也为继续探讨Grx1在信号传导通路方面的作用开拓新的思路。