反义丝裂素活化蛋白激酶核苷酸对血管平滑肌细胞增殖细胞核抗原基因表达的影响

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血管平滑肌细胞(VSMC)增殖在冠状动脉粥样硬化的发生发展中起重要作用。丝裂素活化蛋激酶(MAPK)是细胞增长有关信号刺激细胞增殖、分化的胞内信息传递的交汇点。MAPK的活化,可刺激血管平滑肌细胞增生。增殖细胞核抗原(PCNA)是判断细胞增殖状态的直接的、可靠的指标。反义核苷酸可选择性抑制某些特定基因的表达,从而阻断与这些基因有关的病理过程的发展。反义丝裂MAPK核苷酸对血管平滑肌细胞增殖是否有抑制作用目前尚无定论,本文旨在探讨反义MAPK核苷酸对VSMCPCNA基因表达的影响,了解其是否存在体外阻断VSMC的增殖的作用,为反义MAPK核苷酸在临床的应用提供理论依据。目 的:观察反义MAPK核苷酸对VSMC的PCNA基因mRNA表达的影响,了解其是否具有抑制VSMC增生的作用。<WP=4> 方 法:(1)建立体外培养的大鼠主动脉VSMC模型,用免疫荧光染色方法进行细胞鉴定。(2) 用反义MAPK核苷酸对VSMCJ进行干预培养,应用Northern Blot杂交技术,检测PCNA基因mRNA表达情况,观察反义MAPK核苷酸对VSMC增殖的抑制作用。 结 果:0.8(mol/L的反义MAPK核苷酸预72小时后,血管平滑肌细胞的PCNA基因mRNA表达较对照组(20%FBS)明显减少,二者mRNA含量灰度测定值有显著差异。结 论:(1)反义MAPK寡核苷酸可明显减少体外培养的大鼠VSMC PCNAmRNA的表达,从而抑制其增殖。(2)有力地支持了MAPK是生长分裂信号通路交汇点的观点。
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