WIF-1对人骨肉瘤MG-63细胞中β-catenin表达的作用研究

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目的:WIF-1是Wnt信号通路中最常见抑制因子之一,本实验研究WIF-1对人骨肉瘤MG-63细胞Wnt信号通路中β-catenin表达量的影响。方法:细胞培养人骨肉瘤MG-63细胞,Ong/m1浓度的WIF-1作为空白对照组,分别以Ong/ml、48ng/ml、60ng/ml、80ng/ml、120ng/ml浓度的WIF-1刺激MG-63细胞,分别用FQ-PCR及Western-Blot法从基因水平、蛋白水平测定细胞β-catenin的表达量;细胞培养人骨肉瘤MG-63细胞,用WIF-1刺激细胞,分别在第0、12、24、48、72、96h对各组细胞进行计数,观察空白组及WIF-1刺激组细胞数目的变化情况。结果:不同浓度(Ong/ml、48ng/ml、60ng/ml、80ng/ml、120ng/ml) WIF-1刺激下,FQ-PCR法显示β-catenin mRNA的相对表达总量2-ΔΔCT凹分别为1、0.55±0.30、0.44±0.24、0.35±0.15、0.24±0.21。与空白组相比较,WIF-1刺激下β-catenin mRNA表达量均降低(F=6.02,P<0.05)。随着WIF-1浓度的增加,β-catenin mRNA表达量下降,但组问的抑制作用无明显差别(P>0.05);Western-Blot法显示β-catenin/β-actin蛋白相对表达量分别为1.4±0.11、0.86±0.10、0.51±0.11、0.45±0.06、0.18±0.03;与空白组相比较,差异有统计学意义(F=329.5,P<0.05);在细胞的生长曲线中,空白组及WIF-1刺激组细胞数目有差异,空白组细胞增殖情况优于WIF-1刺激组。结论:WIF-1可降低人骨肉瘤细胞Wnt信号通路中β-catenin表达量,并抑制人骨肉瘤MG-63细胞的增殖。Wnt/β-catenin信号通路在人骨肉瘤细胞中有重要调控作用。
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