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目的研究SEPS1基因在内毒素所致脓毒症小鼠的变化规律及其作用。方法研究分为两部分。第一部分采用内毒素攻击小鼠脓毒症模型研究SEPS1基因在内毒素所致脓毒症小鼠的变化规律。BALB/c小鼠,17~-20g。腹腔内注射内毒素10mg/Kg,84只小鼠随机选取对照组动物10只,其余制作脓毒症模型。正常对照组麻醉后活杀动物。腹腔注射内毒素10mg/Kg复制脓毒症模型后,分别于6h、12h、24h、48h、72h、96h留取肝脏、肺脏标本和血标本,每个时间点随机选取10只小鼠,检测指标包括血生化:血清丙氨酸转氨酶(GPT)、天门冬氨酸转氨酶(GOT)、肌酐(Cr)、血尿素氮(BUN)及肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)含量;肝组织细胞因子TNF-α、IL-6含量;肝组织SEPS1蛋白表达Western Blot检测。第二部分研究siRNA沉默SEPS1基因后对内毒素所致脓毒症小鼠的脏器功能和细胞因子以及SEPS1蛋白表达的影响。30只小鼠随机分为三组:H组(脓毒症组,n=10),K组(scrambled组,n=10),L组(siRNA组,n=10)。实验前12h K组经小鼠尾静脉注射scrambled RNA,L组经小鼠尾静脉注射SEPS1 siRNA。实验当天腹腔内注射内毒素10mg/Kg,连续观察24h。分别于12h、24h留取血标本和组织标本,每个时间点5只动物。用于检测血生化,细胞因子TNF-α、IL-6;核因子NF-κB,SEPS1蛋白表达Western Blot检测。每组中选取一个肺组织和肝组织进行HE染色病理检查和组织化学检测。结果第一部分研究显示脓毒症小鼠心脏、肝脏和肾脏均有不同程度的损伤,表现为GPT、GOT、Cr、BUN及心肌酶CK-MB、CK和LDH含量升高。6h~-24h达到损伤高峰,与0h比较有显著差异(P＜0.05)。随后逐渐下降,并于24h~-72h恢复至损伤前水平。细胞因子白介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子(TNF-α)水平明显升高。0~-48h内损伤持续快速加重,IL-6和TNF-α均在6h达到高峰,与正常对照组0h比较差异显著(P＜0.05)。Western Blot检测脓毒症小鼠肝组织SEPS1蛋白表达显示,正常肝组织中有少量SEPS1蛋白表达,内毒素攻击导致脓毒症小鼠肝脏SEPS1蛋白表达显著升高,并于伤后第24h达峰值。随后逐渐减弱,72h近乎恢复到正常水平。石蜡切片免疫组化研究结果显示正常肝组织中有少量SEPS1蛋白表达。内毒素攻击致脓毒症小鼠肝脏SEPS1蛋白表达逐渐增高,并于伤后第24h达峰值。病理结果显示脓毒症小鼠的肝组织和肺组织明显病变,6h~-12h细胞病变最严重。第二部分研究显示,脓毒症24h时GOT含量三组存在差异,L组(siRNA组)高于H组(脓毒症组)。24h时L组BUN明显高于其它两组(P＜0.05)。心肌酶显示L组(siRNA组)高于H组(脓毒症组)。IL-6和TNF-α检测结果显示L组(siRNA组)高于H组(脓毒症组),尤其24h更显著。NF-κB检测结果显示12h时L组(siRNA组)活性高于K组(scrambled组)(P＜0.05)。Western Blot检测显示H组(脓毒症组)动物12h时肝组织中有大量SEPS1蛋白表达,24h时有所减弱。K组(scrambled组)12h时和24h时表达无明显差异。L组(siRNA组)12h时和24h时表达均较H组(脓毒症组)减弱。石蜡切片免疫组化研究结果显示,siRNA干扰脓毒症小鼠后,三组相比较,K组SEPS1蛋白表达最强,L组和H组表达情况相似。组内比较,各组24h时SEPS1蛋白表达均强于12h。石蜡切片HE染色结果显示内毒素攻击致脓毒症小鼠的肝、肺组织明显病变。结论脓毒症小鼠心脏、肝脏和肾脏均有不同程度的损伤,白介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子(TNF-α)水平明显升高。肝脏SEPS1蛋白表达显著升高,并于伤后第24h达峰值,与组化检测表现一致。siRNA干扰致SEPS1基因沉默可引起脓毒症小鼠脏器损害加重,炎性反应增强,Selenoprotein S1蛋白表达水平下调。推测SEPS1基因对内毒素攻击脓毒症小鼠具有保护作用。