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第一部分:快速构建轻度认知功能障碍大鼠模型的方法目的:探讨应用D-半乳糖(D-gal)快速建立轻度认知功能障碍大鼠模型的方法和合适剂量。方法:大鼠随机分五组,每组20只,模型A、B、C、D组大鼠颈背部皮下分别注射D-gal 100、300、1000、2000 mg/(kg·d)1周,对照组皮下注射等容量生理盐水1周。注射结束后,次日开始Morris水迷宫实验,其中前五天进行定向航行实验,第六天进行60s的空间探索实验。水迷宫实验完成后,随机抽取各组一半的大鼠,麻醉后断头处死,取脑组织并制成匀浆,用ELISA法进行脑匀浆MDA含量、SOD活性及ACh E浓度的测定;各组另一半大鼠麻醉后进行灌注处理,取其脑组织做HE染色,观察海马组织的病理形态学变化。根据轻度认知功能障碍动物模型的特征确定用于建立该模型所需的D-半乳糖剂量。结果:1.各组大鼠存活率均为100%。与对照组比较,D组大鼠体重增加不显著,游泳速度减慢。2.在Morris水迷宫定向航行实验中,第2-5天,C组和D组大鼠平均逃避潜伏期均较对照组大鼠延长(p<0.05);空间探索实验中,C组和D组大鼠60s平均穿越原平台次数分别为3.05±0.76次和2.05±0.69次均较对照组4.40±1.05次显著减少(p<0.05)。3.C组和D组大鼠脑匀浆MDA含量分别为29.19±2.35 ng/ml和32.57±2.05 ng/ml,比对照组20.52±2.08 ng/ml显著增高(p<0.05);C组和D组大鼠脑匀浆SOD活性分别为1.46±0.12 IU/ml和1.34±0.13IU/ml,比对照组1.74±0.12 IU/ml显著降低(p<0.05);C组和D组大鼠脑匀浆ACh E浓度分别为3.52±0.70 ng/ml和4.02±0.39 ng/ml,比对照组1.72±0.33 ng/ml显著增高(p<0.05)。4.病理形态学结果显示,C组大鼠海马CA1区部分椎体细胞缺失,细胞密度稍下降,较多量椎体细胞显示胞核固缩、深染,出现少量细胞凋亡,脑白质正常;D组大鼠CA1区椎体细胞密度明显下降,排列明显疏松、紊乱,多量细胞出现胞核固缩、深染,细胞凋亡。结论:大鼠皮下注射D-gal 1000 mg/(kg·d)1周,出现符合轻度认知功能障碍动物模型的病理变化及其特征改变。第二部分:不同吸入浓度七氟烷对D-半乳糖致轻度认知功能障碍大鼠认知功能的影响目的:研究不同浓度七氟烷对轻度认知功能障碍大鼠的影响,初步探讨七氟烷影响该类大鼠的术后认知功能的可能机制。方法:大鼠皮下注射D-gal 1000 mg/(kg·d)1周以建立轻度认知功能障碍大鼠模型。建模后的大鼠按照随机数字表法分组,M0组吸入100%O2(2L/min)3h;M1组吸入2%七氟烷与100%O2(2 L/min)3h;M2组吸入4%七氟烷与100%O2(2 L/min)3h。停止吸入后,采取各大鼠尾静脉血进行血气分析;24小时后所有大鼠进行水迷宫实验,完成后,随机抽取各组一半的大鼠,麻醉后断头处死,取脑组织并制成匀浆,用ELISA法测定Aβ1-42蛋白和Tau蛋白含量;各组另一半大鼠麻醉后进行灌注处理,取脑组织做HE染色,观察海马组织的病理形态学改变。结果:1.各组大鼠均苏醒良好,无死亡。血气分析显示各组间PH、Pa O2、Pa CO2、HCO3-值无明显差异(p>0.05)。2.在Morris水迷宫定位航行实验中,与M0组相比,M1组大鼠每天的逃避潜伏期延长无统计学意义(p>0.05),而M2组大鼠每天的逃避潜伏期延长有统计学意义(p<0.05)。在水迷宫空间探索实验中,与M0组为3±0.73次相比,M1组大鼠的穿台次数为2.88±0.72次,差异无统计学意义(p>0.05),而M2组大鼠的穿台次数为2±0.63次,差异有统计学意义(p<0.05)。3.与M0组26.53±3.38 ng/ml相比,M1组大鼠脑匀浆中Aβ1-42蛋白含量为28.77±3.06 ng/ml,差异无统计学意义(p>0.05),而M2组大鼠脑匀浆中Aβ1-42蛋白含量35.05±2.68 ng/ml,差异有统计学意义(p<0.05)。与M0组265.06±26.03 ng/ml相比,M1组大鼠脑匀浆中Tau蛋白含量为278.29±25.13 ng/ml,无统计学意义(p>0.05),而M2组大鼠脑匀浆中Tau蛋白含量317.79±23.45 ng/ml,差异有统计学意义(p<0.05)。4.病理形态学结果显示,M0组大鼠海马CA1区部分椎体细胞缺失,细胞密度稍下降,较多量椎体细胞显示胞核固缩、深染,出现少量细胞凋亡,脑白质正常;M1组大鼠海马CA1区椎体细胞排列疏松,细胞出现核固缩、深染,少量细胞凋亡;M2组大鼠海马CA1区椎体细胞密度明显下降,排列明显疏松、紊乱,多量细胞出现胞核固缩、深染,细胞凋亡。结论:1.吸入4%七氟烷可导致轻度认知功能障碍模型大鼠的认知功能继续恶化。2.七氟烷可能是由于诱导大鼠大脑中Aβ1-42蛋白沉积和/或Tau蛋白增多而影响大鼠的学习记忆能力,损害其认知功能。