目的:研究白藜芦醇(RSV)对西妥昔单抗(C225)耐药细胞的耐药逆转作用以及抑制细胞增殖、促进凋亡的作用,探讨了miR-31-5p在西妥昔单抗耐药细胞与敏感细胞中的表达的差异,并深入研究白藜芦醇对逆转西妥昔单抗继发耐药的作用机制,从而为继发性西妥昔单抗耐药的治疗提供新的思路。方法:以人工诱导的结直肠癌西妥昔单抗耐药细胞株H508/CR为研究对象,通过对耐药以及敏感株的高通量测序,分析耐药以及敏感株中差异表达的miRNA。通过CCK-8法检测不同浓度下白藜芦醇以及西妥昔单抗对H508/CR细胞生长抑制作用;利用流式细胞术检测白藜芦醇单药或联合西妥昔单抗时对H508/CR细胞的凋亡诱导情况;通过q-RT-PCR检测耐药细胞中miRNA的分子表达水平;通过miRNA inhibitor抑制miR-31-5P表达,以及其对白藜芦醇以及西妥昔单抗单药或联合作用时的影响。Western blot检测白藜芦醇单药或联合西妥昔单抗对继发性西妥昔单抗耐药细胞中凋亡相关蛋白和AKT、p-AKT蛋白的表达影响。结果:MiR-31-5P在H508/CR细胞中的较H508细胞中表达明显上升。白藜芦醇可以逆转耐药细胞对西妥昔单抗的耐药,表现为抑制细胞增殖,促进凋亡,上调BAX蛋白以及cleaved caspase-3的表达,降低BCL-2的表达。并且,过表达miR-31-5P可以抵消白藜芦醇对西妥昔单抗耐药的逆转作用。进一步机制研究发现,白藜芦醇通过抑制AKT的磷酸化从而抑制了AKT通路逆转了肠癌细胞对西妥昔单抗的继发性耐药。结论:白藜芦醇通过调节miR-31-5P表达进而抑制了Akt/Bcl-2信号通路使对西妥昔单抗耐药的肠癌细胞重新对西妥昔单敏感。