碱蓬SsMBTF基因克隆及功能分析

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干旱和盐碱是造成农业减产的主要原因,从盐生植物中克隆耐旱耐盐基因有助于培育具有耐旱耐盐特性的植物新品种。本研究的目的是利用RT-PCR技术从盐生植物碱蓬中克隆SsMBTF基因,并对其功能进行研究。研究结果表明,SsMBTF基因开放性可读框全长399bp,不含有内含子结构,编码一个包含132个氨基酸的蛋白,分子量为15544.9Da,等电点为10.14。该蛋白是一种MEF2型的MADS-box转录因子,定位于细胞核中。定量分析结果表明SsMBTF基因在根、茎、叶中均有表达,在根中表达相对较少,在叶中的表达量最多。在24h内SsMBTF基因表达呈现由低到高再下降的节律变化,SsMBTF基因受PEG诱导高表达,略受盐、冷、热等胁迫诱导表达,而对ABA不敏感,说明SsMBTF基因表达具有渗透胁迫专一性的,而且不依赖于ABA信号调控途径。SsMBTF异源表达获得大肠杆菌重组子,在高盐、高渗条件下重组子生长快于对照(含空载体大肠杆菌),说明SsMBTF在高盐、高渗下保护重组子免遭生长抑制起作用。构建了pCAMBIA1300-MBTF过表达载体,转化农杆菌,侵染拟南芥植株,获得了T1代种子。
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