【摘 要】
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目的:探讨泽泻醇A通过PI3K-AKT信号通路保护氧糖剥夺/再复氧(OGD/R)损伤小鼠脑微血管内皮细胞(b End.3)的作用和机制。方法:CCK8法检测2μmol/L、20μmol/L、40μmol/L、80μmol/L、160μmol/L、240μmol/L和320μmol/L泽泻醇A对b End.3细胞活力的影响,明确药物毒性及药物半抑制浓度IC50值;构建b End.3 OGD/R模型,
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目的:探讨泽泻醇A通过PI3K-AKT信号通路保护氧糖剥夺/再复氧(OGD/R)损伤小鼠脑微血管内皮细胞(bEnd.3)的作用和机制。方法:CCK8法检测2μmol/L、20μmol/L、40μmol/L、80μmol/L、160μmol/L、240μmol/L和320μmol/L泽泻醇A对bEnd.3细胞活力的影响,明确药物毒性及药物半抑制浓度IC50值;构建bEnd.3OGD/R模型,CCK8法检测不同缺氧时间及不同浓度泽泻醇A干预bEnd.3细胞后细胞活力变化,确定造模条件及药物干预时间。乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测LDH;活性氧(ROS)检测试剂盒测定胞内ROS;酶联免疫吸附(ELISA)测定IL-1β和TNF-α水平;荧光素标记葡聚糖(FITC-Dextran70)检测细胞通透性;划痕实验及侵袭实验检测细胞迁移、侵袭能力;流式细胞术检测细胞凋亡;RT-qPCR检测细胞Bcl-2mRNA和BaxmRNA表达水平;westernblot检测细胞p-PI3K、PI3K、p-AKT、AKT、Bcl-2、Bax蛋白表达水平。结果:1.泽泻醇A对OGD/R损伤bEnd.3的保护作用(1)细胞活力:2μmol/L、20μmol/L、40μmol/L泽泻醇A对细胞无明显毒性作用,80μmol/L、160μmol/L、240μmol/L和320μmol/L泽泻醇A抑制细胞活力,且160μmol/L、240μmol/L和320μmol/L泽泻醇A毒性作用明显;与对照组相比,OGD/R组细胞活力明显降低(P
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